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Duchenne型筋ジストロフィーの遺伝子治療の試み-mdxマウスを用いて-

Research Project

Project/Area Number 06670790
Research Category

Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Pediatrics
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

乾 幸治  大阪大学, 医学部, 講師 (90175208)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 岡田 伸太郎  大阪大学, 医学部, 教授 (30028609)
金田 安史  大阪大学, 細胞生体工学センター・細胞構造機能, 助教授 (10177537)
Project Period (FY) 1994
Project Status Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1994: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywordsclystrophin / HVS-Iiposome / 遺伝子治療 / mdxマウス
Research Abstract

目的)昨年度、dystrophin欠損筋ジフトロフィーモデルマウス(mdx mouse)へのin vivoにおけるヒトdystrophinの一過性発現をHVJ-Iiposome法を用いて行い報告した。本年度は、培養mdx mouse myoblastに対してin vitroでHVJ-Iiposome法を用いたdystrophinの発現を行った。またBecker型dystrophin mini gene(6.3Kb)の発現をretrovirus vectorに成功したので報告する。
対象・方法)4-8週齢のmdx mouseより取り出した大腿四頭筋を培養したmyoblast rich cultureものを対象とした。pRSV-Dy vectorを用い、遺伝子導入後10日を越えた時点でのdystrophin染色をもって判断した。retrovector pBN1をlipofectionを用いてpackaging cell line Ψ2に導入、recombinant virusを調製した。recombinant virusを感染後、1週間G418を加えたmedium中で培養、G418耐性クローンにdystrophin染色を行った。
結果)dystrophin陽性筋芽細胞は、コントロール(遺伝子導入を行ってない)0に対して遺伝子導入を行ったものは1-10/10^5の頻度で筋芽細胞細胞膜がdystrophin陽性であった。これらの陽性細胞は1つの部位に固まって筒状に存在することから1個のdystrophin陽性筋芽細胞が分裂・増殖を行ったものと考えられる。Retrovirusを用いてmini dystrophin geneを導入したG418耐性筋芽細胞の中約70%の細胞がdystrophin陽性であった。

Report

(1 results)
  • 1994 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All Other

All Publications (7 results)

  • [Publications] Sakai,N et al.: "Purification and characlerzation of...." J.Biochem.116. 615-620 (1994)

    • Related Report
      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Hayashi,J.et al.: "Functional and morphdogical abnormalitees...." J.Biol.Chem.269. 19060-19066 (1994)

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      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Tukamoto,H.et al.: "One base deletion in the cysteine-rich...." Hum.Mde.Genet.3. 995-996 (1994)

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      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Sakai,N.et al.: "Krabbe disease; isolation and charaeterization...." Biochem.Biophys.Res.Commun.198. 485-491 (1994)

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      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Wada,Y et al.: "Diagnosis of Corbohy drate-deficient...." Biol.Mass Spects.23. 108-109 (1994)

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  • [Publications] 乾: "Annual Review内分泌,代謝,1994 先天性代謝異常" 中外医学社, 4 (1994)

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  • [Publications] 乾: "呼吸器症候群 ムコ多糖症" 日本臨床, 4 (1994)

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Published: 1994-04-01   Modified: 2016-04-21  

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