皮膚癌におけるヒト乳頭腫ウイルスと癌抑制遺伝子変異との関係の解析

Research Project

Project/Area Number	06670886
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Dermatology
Research Institution	Osaka Medical College
Principal Investigator	草壁秀成大阪医科大学, 医学部, 講師 (00195421)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	酒谷省子大阪医科大学, 医学部, 助手 (20196075) 清金公裕大阪医科大学, 医学部, 教授 (50085023)
Project Period (FY)	1994
Project Status	Completed (Fiscal Year 1994)
Keywords	皮膚癌 / ヒト乳頭腫ウイルス / 癌抑制遺伝子 / HPV / p53
Research Abstract	皮膚悪性腫瘍とHuman papilloma virus(HPV)および癌抑制遺伝子(p53)との関係を明かとするため以下の実験を施行した。皮膚悪性腫瘍の生組織あるいはパラフィン切片よりDNAを抽出し、HPVについてはコンセンサスプライマーを用いたpolymerase chain reaction(PCR)法によりDNAを増幅し、RsaI・DseI・HaeIIIの各制限酵素による切断パターンによりHPVのtypingを決定した。またin situ hybridization法によりタイプ別のHPV-probeを用いてその組織内でのHPV-DNAの局在を検討した。p53については生組織あるいはパラフィン切片よりDNAを抽出し、PCR-SSCP(single strand conformation polymorphism)法によりp53のExon 4,5,6,7,8の各領域についてそのmutationの有無を検討し、またp53のポリクローナル抗体(DO-7)を用いて免疫組織学的染色を施行した。 Bowen病 11例、有棘細胞癌 5例、Trichilemmal carcinoma 2例、Clear cell sarcoma 1例などにおいてはHPV-DNAおよびp53のmutationは検出されなかったが、外陰部Bowenoid papulosis 1例と足底に生じたVerrucous carcinoma 1例においてHPV-16が検出され、in situ hybridization法により表皮顆粒層核内にHPV-16の局在が確認された。しかしp53のmutationはPCR-SSCP法および免疫組織染色では検出されなかった。今後さらに症例を重ね検討して行きたい。