ヒト食道癌におけるRT-PCR法を用いた制癌剤耐性関連遺伝子の発現量測定の意義

• Project/Area Number: 06671305
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 小澤 壯治 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10169287)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 池田 佳史 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20222870) ; 佐藤 道夫 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50215852)
• Project Period (FY): 1994
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1994)
• Budget Amount: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000); Fiscal Year 1994: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: 食道癌 / RT-PCR法 / 制癌剤耐性

Research Abstract

1.材料と方法:
(1)食道癌をはじめとする6種類の扁平上皮癌細胞株、および食道癌の内視鏡生検材料を用いた。
(2)GST-π、mdr-1、MT-IIAに対するPCRプライマーを作製した。
(3)制癌剤に対する感受性試験はMTTアッセイを用いた。
(4)遺伝子発現量の定量はNorthern blot法とRT-PCR法を用いた。
2.結果:
(1)癌細胞と臨床組織より得られたtotal RNAに対して、RT-PCR法を行い、GST-π、mdr-1、MT-IIAに対応する435bp,290bp,179bpの大きさのPCR産物が得られた。これらは、プライマーの設計時に予想した大きさであった。
(2)PCR産物と至適PCRサイクル数をそれぞれのプライマーについて求めた。
(3)癌細胞株のCDDP耐性は、GST-π、MT-IIAのmRNAレベルと、ADM耐性はMT-IIAのmRNAレベルと正の相関を示した。
(4)ヒト食道癌組織中のmdr-1mRNAレベルは正常粘膜に比べて高く、逆にGST-π、MT-IIAのmRNAレベルは低い傾向にあった。
(5)食道癌組織中のMT-IIAのmRNAレベルは、CDDPによる増殖抑制率と負に相関する傾向にあった。