ラミニンの機能シグナル移植による機能シグナル再構成系の確立

• Project/Area Number: 06680710
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Cell biology
• Research Institution: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• Principal Investigator: 前田 利長 大阪府立母子保健総合医療センター研究所, 病因病態部門, 研究員 (20250342)
• Project Period (FY): 1994
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1994)
• Keywords: シグナル移植 / IKVAV配列 / 細胞接着 / 遺伝子工学

Research Abstract

基底膜の主な構成成分であるラミニンに存在するIIe-Lys-Val-Ala-Val(IKVAV)配列は細胞接着活性の他に細胞伸展活性、細胞増殖活性、コラゲナーゼIV合成の増加作用を持つことが報告されている。そのIKVAV配列を遺伝子工学を用いて、バクテリアの免疫グロブリンG(IgG)結合蛋白質であるプロテインA分子上に移植した組み換え蛋白質を3種類作成した。プロテインA分子のN末端にIKVAV配列を持つもの、3番目のIgG結合領域中に持つもの、そして、C末端部分に持つものである。それぞれのをプラスチックプレート上にコートし、線維芽肉腫(HT1080)細胞、横紋筋肉腫(RD)細胞、メラノーマ(B16F10)細胞、クロム親和性(PC12)細胞が接着するか、接着後伸展するか、また、PC12細胞では接着後神経突起の伸展が見られるかどうかを調べた。HT1080細胞、RD細胞、B16F10細胞は共に、3種類のIKVAV配列移植プロテインAには接着できなかった。一方、コントロールのGRGDSP配列移植プロテインA(インテグリンαvβ3で認識される)やEILDVPST配列移植プロテインA(インテグリンα4β1で認識される)には接着し、伸展した。また、PC12細胞は、シグナルを移植したプロテインAにもシグナルを移植しいないプロテインAにも接着したため、移植シグナルを介しているかどうかは判断できなかった。
今後、機能シグナルを移植する蛋白質をPC12細胞の接着しない蛋白質に変えて、同様の実験をする予定である。