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AFP調節遺伝子を用いた腫瘍細胞に特異的な毒素遺伝子発現による抗腫瘍効果の検討

Research Project

Project/Area Number 06770988
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Digestive surgery
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

村山 良彦  慶応義塾大学, 医学部, 助手 (30239553)

Project Period (FY) 1994
Project Status Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help
¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1994: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
KeywordsAFP遺伝子 / ジフテリア遺伝子 / 遺伝子治療
Research Abstract

我々は、細胞特異性のあるAFP遺伝子のエンハンサー/プロモーターの下流に殺細胞毒素遺伝子を有するプラスミドを作製し、AFP産生性腫瘍細胞に導入して、その効果をin vitroにて検討する研究を考察した。
昨年度までにAFP調節遺伝子の標的細胞での転写活性の特異性を検討するために、レポーター遺伝子としてAFP遺伝子の5'側上流5.1kbを含むCAT遺伝子(pAF5.1CAT)を用い、特異的なCAT発現を認めた。本年度の実績は、
1.AFPエンハンサー/プロモーター領域の下流に殺細胞遺伝子として、ジフテリア毒素A鎖の遺伝子を組み込んだプラスミド(pAF5.1DTA)を作製した.
2.ヒトAFP産生性肝癌株(Huh-7,HepG2)と、非産生株(NUE,MKN-45)に、pAF5.1CATとcotransfectionし、CAT発現の抑制をもって抗腫瘍効果の検討を行った.Huh-7,HepG2において対照として加えた逆向きにつないだ毒素遺伝子を有するプラスミド(pAF5.1DTA-R)投与群に比較し、CAT発現が抑制されていた.
AFP遺伝子のエンハンサー/プロモーターを用いることにより、標的細胞に特異的な毒素発現の可能性が示唆された.これを遺伝子治療に応用すべく、リポソームに包埋しin vivoでの有用性についても検討中である.

Report

(1 results)
  • 1994 Annual Research Report

URL: 

Published: 1994-04-01   Modified: 2016-04-21  

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