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ヒト線維芽細胞由来がん細胞遊走促進因子の同定とそれに対する抗体作製

Research Project

Project/Area Number 06771660
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 病態科学系歯学(含放射線系歯学)
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

林堂 安貴  大阪大学, 歯学部, 助手 (70243251)

Project Period (FY) 1994
Project Status Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1994: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywordsがん浸潤 / 細胞遊走促進因子 / 上皮-間葉相互作用 / 線維芽細胞
Research Abstract

これまでin vitro浸潤モデルを用いて口腔癌の浸潤増殖機構に与える線維芽細胞の影響について解析を行い、線維芽細胞の産生する液性因子が口腔癌の細胞遊走を強く促進することを見いだした。本研究では線維芽細胞培養上清より癌細胞の遊走を促進する因子の分離しその作用機序の解析を行った。線維芽細胞の培養上清を限外濾過にて濃縮後、FPLCシステムを用いてSuperdex 200pgカラムに展開・溶出させた。その結果、50〜70kDaの画分に口腔癌細胞遊走促進活性が認められた。さらに同画分をヘパリン親和性カラム、Mono Qカラム等を用いて精製を進めたところ、熱及び還元に比較的安定な約50kDaの蛋白が分離された。同蛋白の遊走活性は抗β1インテグリン抗体やGRGDS及びYIGSRによって影響を受けないことから細胞外基質蛋白とは区別され、精製過程や生化学的性質より既知の成長因子とは異なる新しい蛋白であることが示唆された。同蛋白は口腔癌細胞のストレスファイバーの形成を抑制し、細胞膜のラッフリング引き起こすことがわかった。さらに本蛋白の遊走活性はチロシンキナーゼ阻害物質のゲニステインで強く抑制されることより、その作用発現にチロシンキナーゼによる細胞蛋白のリン酸化の関与が推測された。また、本蛋白は百日咳毒素によってその活性が阻害された。以上の結果より、線維芽細胞の産生するがん細胞遊走促進因子はGi蛋白共役受容体を介してチロシンキナーゼを活性化し細胞骨格系を制御して細胞の運動能を亢進させていると考えられた。

Report

(1 results)
  • 1994 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Shirasuna K: "Extracellular matrix production and degradation by adenoid cystic carcinoma cells:participation of plasminogen activator and its inhibitor in matrix degradation." Cancer Res.53. 147-152 (1993)

    • Related Report
      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Hayashido Y: "Effect of epidermal growth factor on invasion of human squamous cell carcinoma cells into collagen gel." The Cancer J.4. 257-261 (1991)

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      1994 Annual Research Report
  • [Publications] 林堂 安貴: "口腔扁平上皮癌の浸潤増殖における上皮成長因子(EGF)と線維芽細胞の関与." 大阪大学歯学雑誌. 36. 483-500 (1991)

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      1994 Annual Research Report
  • [Publications] Shirasuna K: "Immunohistochemical localization of epidermal growth factor(EGF)and EGF receptor in human oral mucosa and its malignancy." Virchows Archiv A Pathol Anat.418. 349-353 (1991)

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      1994 Annual Research Report

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Published: 1994-04-01   Modified: 2016-04-21  

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