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運動ニューロンに発現するチロシンキナーゼの解析

Research Project

Project/Area Number 06780639
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Nerve anatomy/Neuropathology
Research InstitutionKumamoto University

Principal Investigator

太田 訓正  熊本大学, 医学部, 助手 (90244128)

Project Period (FY) 1994
Project Status Completed (Fiscal Year 1994)
Budget Amount *help
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1994: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywords運動ニューロン / チロシンキナーゼ / Sek
Research Abstract

生体内において細胞の増殖、分化、決定など重要な役割を担っているチロシンキナーゼ(TK)に注目し、運動ニューロンの初期発生に関与するTKの検索を行った。TK細胞内のキナーゼドメインはよく保存されているので、この領域に対するプライマーと運動ニューロンを特異的に認識するモノクローナル抗体SC1を用いたパンニング法により精製された運動ニューロンを用いてRT-PCR法を行った。様々な種類のTKの中から運動ニューロンに特異的に発現しているレセプター型TK(chick Sek)が得られた。
PCRフラグメントを用いて脊髄から作製したcDNAライブラリーをスクリーニングし、全長を決定したところ986アミノ酸からなるtype I型の膜蛋白質であった。ホモロジー検索によりephファミリーに属するマウスSekのホモローグであることが明らかになった。
In situ hybridization法を用いてchick Sek mRNAの局在を調べたところchick Sekはニワトリ胚脊髄において運動ニューロンに一過性に発現するが、すべての運動ニューロンには発現せず、羽や足の筋肉を神経支配する運動ニューロンに特異的に発現し、体の筋肉を神経支配する運動ニューロンには発現が見られなかった。
モノクローナル抗体を作製し、chick Sek蛋白質の分布を調べたところ、chick Sek蛋白質は腕部と腰部の運動ニューロンの細胞体とその軸索に発現していたが、胸部のニューロンでは発現が認められなかった。Whole-mount immunostainingを行なったところchick Sek蛋白質は後脳の構造であるロンボメアのr3とr5、耳、新しくできたsomiteに発現していた。

Report

(1 results)
  • 1994 Annual Research Report

URL: 

Published: 1994-04-01   Modified: 2016-04-21  

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