| Project/Area Number |
06836012
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| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
血管生物学
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
三輪 岳志 大阪大学, 遺伝情報実験施設, 助教授 (20174229)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 克仁 大阪府立成人病センター, 研究所第5部, 主査
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| Project Period (FY) |
1994
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1994)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1994: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | アクチン / カルポニン / 循環器病 / 血管平滑筋細胞 |
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| Research Abstract |
動脈硬化病巣や内膜損傷後に新生内膜で増殖する合成型血管平滑筋細胞(SMC)は、高い遊走能と増殖性をもち、これが病変の発生と進展に深く関わっているらしい。カルポニンは平滑筋アクチン結合蛋白質で、in vitroでそのcDNAをSMCに導入すると細胞の増殖、遊走が抑制され、また新生内膜SMCにおいてカルポニンの発現は低下すること等を見い出しており、SMCの増殖抑制との関係に興味が持たれる。従って、カルポニン過剰発現トランスジェニック個体を作成して、血管機能の解析を行なう計画を立てた。
まず、血管平滑筋特異的に遺伝子を過剰発現させるため、SMCで多量に発現している血管平滑筋アクチン遺伝子の発現調節系を調べ、血管平滑筋特異的発現ベクターを作成した。この遺伝子の発現調節領域は第一エキソン上流のプロモーター部位と第一イントロン内部に見いだされ、核内因子の結合するDNAエレメンとして3種類が同定された。このベクターの転写活性を調べるトランスジェニックマウスを作成し、各臓器における転写活性を測定したところ、大動脈・心臓などの動脈中膜、食道粘膜筋板や小腸の筋装置などの平滑筋に富む組織で特異的に高い転写活性が見られ、肝臓などでは全く活性がなかった。したがって、このベクターは平滑筋特異的転写活性部位があることが確認された。
現在のこのベクターを利用して、カルポニン過剰発現トランスジェニックマウス、またはラットを作成中であり、これら個体でのカルポニンの発現量をmRNAとヒトのカルポニン特異的抗体で確認し、動脈擦過試験などの生体実験に用いる予定である。
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