活性酸素による増殖関連遺伝子誘導の分子機構

Research Project

Project/Area Number	07253224
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	野瀬清昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	真下順一昭和大学, 薬学部, 助手 (60054045) 荒田悟昭和大学, 薬学部, 助手 (20159502)
Project Period (FY)	1995
Project Status	Completed (Fiscal Year 1995)
Budget Amount *help	¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000) Fiscal Year 1995: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Keywords	活性酸素 / 遺伝子発現 / レドックス制御 / FE遺伝子 / 炎症性サイトカイン
Research Abstract	遺伝子発現における活性酸素の役割を明らかにする目的で、レドックスにより発現が制御されていることが示唆されている炎症性サイトカインJE遺伝子の発現機構を検討した。JEmRNAレベルは、血清、TPA、TNFα、および過酸化水素など種々の刺激により、マウス胎児由来細胞Balb/c3T3において顕著に誘導された。JEmRNAの発現、特にTPAおよびTNFαによるものは、活性酸素消去剤pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC)およびtetramethylthiouria (TMTU)により著しく抑制された。また細胞内酸化状態をレドックス感受性蛍光試薬を用いて共焦点レーザー顕微鏡で調べた結果、TPAおよびTNFα処理により一過性に酸化状態が高まること、PDTCおよびTMTUによりこの上昇が完全に抑制されることが確認された。さらに、TPAおよびTNFαによるJEmRNA発現、および活性酸素消消去剤によるその抑制は、共に転写レベルの抑制であった。これらの結果は、JEmRNA発現に転写レベルのレドックス抑制の存在を示唆している。そこで、レドックス抑制に関連するエレメントを解析する目的でJE遺伝子の5'上流2600bpを用いて、種々のCAT発現系を作製して検討した。その結果、当初予想していたプロモーター領域近傍ではなく、5'上流2000〜2500bpの間にレドックス制御エレメントの存在が示唆された。現在、この領域についてさらに詳細に検討している。