| Budget Amount *help |
¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Fiscal Year 1995: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
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| Research Abstract |
大腸菌RuvCタンパク質は相同組換え反応の中間体であるホリデ-構造を特異的に認識し切断するエンドヌクレアーゼである。ホリデ-構造は,相同な2分子の2重鎖DNAが相互に単鎖DNAを交換しリンクしたユニークな高次構造である。それをRuvCがどのように認識して切断するかという点に注目して,タンパク質の構造と機能との相関関係を明らかにすることが,本研究の目的である。我々は,前年度までに,X線結晶構造解析によりRuvCの立体構造を明らかにしており,また,構造との相関を図るために,多数のミュータントを単離していた。本年度においては,今までの解析や準備をもとに,RuvCミュータントタンパク質をそれぞれ精製し,各々の生化学的な解析を行い,in vivoのキャラクラリゼーションと併せて,RuvC蛋白質の機能(活性中心,DNA結合,2量体形成など)に関与するアミノ酸残基をほとんどすべて同定することができた。
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