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生体分子エンジン素過程の高速顕微画像解析システムの開発

Research Project

Project/Area Number 07558227
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section展開研究
Research Field Biophysics
Research InstitutionWaseda University

Principal Investigator

石渡 信一  早稲田大学, 理工学部, 教授 (10130866)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 伊藤 博康  浜松ホトニクス(株), 筑波研究所, 研究員
Project Period (FY) 1995 – 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥5,200,000 (Direct Cost: ¥5,200,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000)
Keywords高速顕微画解析システム / 温度パルス顕微鏡法 / アクチンミオシン系 / 微小管-キネシン系 / ミオシン分子モーター / キネシン分子モーター / 滑り運動系 / 生体分子モーター / 顕微画像解析 / レーザー光ピンセット / アクトミオシン分子モーター / 硬直結合 / 高速顕微画像解析システム / 温度パルス顕微鏡
Research Abstract

(1)温度パルス顕微鏡法(*)に高速顕微画解析システムを組み合わせ、温度の上昇・下降速度を画像解析したところ、緩和時間は、上昇・下降ともに約6msであることが分かった。一方ガラス表面に直径10μmの円状に金属(アルミ)を蒸着し、その部分に赤外光を照射することによって蒸着金属面を熱源とする温度パルス法では、温度分布の再現性は第一の方法に比べて高いが、緩和時間は数十msと遅かった。そこで第一の方法をアクトミオシンモーターの滑り運動系に応用し、温度上昇と滑り運動との関係を解析したところ、約6ms遅れて滑り運動が始まることが分かった。この時間遅れがモーターのどのような状態に対応するかの解明は、今後解決すべき問題として残された。主要な結果は論文としてまとめ、現在投稿中である。
(*):光学顕微鏡の試料面に撒かれた金属粉末の塊(5μm程度の大きさ)に赤外レーザー光(波長約1μm)を照射し、この金属塊を熱源として半径約数十μmにわたって同心円状の温度分布を得る方法。
(2)さらに温度パルス顕微鏡法を、アクチンミオシン系だけでなく微小管-キネシン系に応用した。その結果、18℃から約40℃に上昇すると、滑り速度は約0.4μm/sから約4.0μm/sへと上昇した。4.0μm/sという滑り運動は、これまで知られていたキネシン分子モーターの滑り速度の数倍にも達する。キネシン分子モーターの機能は、ミオシン分子モーターに比べて温度に対して弱いことも分かった。また、キネシン分子モーターは一分子でも滑り運動をすると言われているが、我々は一分子のレベルでも、キネシンの滑り運動機能が熱的に励起されることを確認した。従って、滑り運動機能の熱励起の研究は、温度パルス顕微鏡法と、高速カメラの組み合わせによって初めて可能になることが確認された。

Report

(3 results)
  • 1997 Annual Research Report
  • 1996 Annual Research Report
  • 1995 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All Other

All Publications (10 results)

  • [Publications] Y.C. Sasaki et al.: "Two-Dimonsional Arrangement of a Functional Protein by Cysteine-Gold Intaraction : Enzyme Activity and Charactorization of a Protein Monolayer" Biophys. J.72・4. 1842-1848 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] I. Sase et al.: "Axial rotadion of sliding arth filaments revealed by single-fluovophore imaging" Proc. Natl. Aced. Sci. USA. 94. 5646-5650 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] S. Ishiwata et al.: "Interhead Distances in Myosin Attached to F-Achn Estimated by Fluorescena Energy Transfer Spectros copy" Biophys. J.73・2. 895-904 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] M. Hotta & S. Ishiwata: "Temperature dependence of association and dissociation rate constants of rhodamine phalloidin with actin Felaments" J. Musch Res. Cell motil.18・4. 491- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] H. Fujita & S. Ishiwata: "Confractilidy and its regulation of this filament-reconstiuted condiac musch fibres-muntigadon of the role of regulatory proteins in spontaucono feujion osullation" J. Musch Res. Cell motil.18・4. 495- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 石渡信一: "心筋の収縮と超分子の自己組識化" 科学. 68・2. 110-113 (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] H. Sugi ed.: "Current Methods in Musch Physiology : Chop. 8" Oxford Univ. Press., 376 (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 石渡信一編: "生体分子モーターの仕組み" 共立出版, 214 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Fujita,H.: "Structeral and furetional reamstitetion of thin filaments in the contrastile apparatns of cardiac muscle." Biophys.J.71. 2307-2318 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Fujisaki,H.: "Soft-X-ray danage to bilologike samplis." J.Microscopy. 182. 79-84 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report

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Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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