Project/Area Number |
07680792
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Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Research Field |
Developmental biology
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
山下 正兼 北海道大学, 大学院・理学研究科, 助教授 (30202378)
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Project Period (FY) |
1995
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 1995)
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Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1995: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
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Keywords | cdc2 / サイクリンB / MPF / 魚類 / 両生類 / 卵成熟 / mRNA結合タンパク質 / 減数分裂 |
Research Abstract |
1卵成熟誘起ホルモン刺激によるサイクリンB合成開始の分子機構 キンギョ卵成熟誘起に必須のサイクリンBmRNA翻訳開始機構を探る第一歩として、インビトロで作製したキンギョサイクリンBmRNA、cdc2mRNA、アクチンmRNAをプローブに、ノースウエスタン法、UVクロスリンク法、ビオチン標識RNAアフィニティー法により、サイクリンBmRNAに特異的に結合するタンパク質の検索を行った。その結果、サイクリンBmRNAに特異的に結合するタンパク質は発見できなかったが、約90、50、35kDaのRNA結合タンパク質が発見された。今後、これらを精製し、そのアミノ酸配列の一部を決定し、cDNAクローニングを行う計画である。 2ツメガエル以外の両生類における卵成熟促進因子(MPF)の形成・活性化機構 アカガエルサイクリンB1、B2に対する抗体を作製し、卵成熟過程におけるこれらタンパク質の挙動を調べた。その結果、サイクリンB1は未成熟卵に存在せず、サイクリンB2は存在したが、cdc2と複合体を形成していなかった。つまり、キンギョと同様、アカガエル未成熟卵にはpre-MPFは存在せず、ホルモン刺激後cdc2とサイクリンBの複合体(MPF)が形成された。しかし、キンギョと異なり、ツメガエルと同様、MPFの活性化はバナデ-トや抗cdc25抗体で阻害された。これらのことは、アカガエルはキンギョとツメガエルの中間的なMPF形成・活性化機構を採用していることを示す。
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Report
(1 results)
Research Products
(6 results)