| Project/Area Number |
07740637
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
生物形態・構造
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| Research Institution | Teikyo University of Science & Technology |
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Principal Investigator |
平井 俊朗 西東京科学大学, 理工学部, 助手 (30238331)
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| Project Period (FY) |
1995
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1995)
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| Budget Amount *help |
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1995: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | 卵成熟 / 卵成熟促進因子(MPF) / 卵成熟誘起ホルモン(MIH) / プロテインキナーゼ |
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| Research Abstract |
ホルモンによる魚類卵成熟誘起分子機構を明らかにする目的で、これまでにその中核をなす卵成熟促進因子(MPF)がサイクリンBとcdc2キナーゼの複合体であることを証明した。本研究では卵成熟誘起への他のプロテインキナーゼの関与を調べ、以下の結果を得た。
サイクリンAはサイクリンBと同様、体細胞分裂においてcdk(サイクリン依存性キナーゼ)と複合体を形成し、その活性を調節することで細胞周期を制御することが知られている。しかし、サイクリンAの卵成熟(減数分裂)における挙動や機能については知見が無い。そこで大腸菌により生産したキンギョ組換えサイクリンAタンパク質を抗原としてモノクローナル抗体を作製し、卵成熟過程におけるこの分子の挙動を解析した。サイクリンAはMPFの構成分子であるサイクリンBとは異なり、未成熟卵中にすでに存在しており、卵の付活に伴って消失した。また、cdc2キナーゼとは複合体を形成するが、cdk2キナーゼとは複合体を形成していないことが明らかとなった。卵成熟誘起ホルモン(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one)によって卵核胞崩壊(GVBD)が誘起されるのに伴って、MPF(サイクリンB-cdc2複合体)が活性化されることが知られている。これに対してサイクリンA-cdc2複合体のキナーゼ活性はGVBDが完了するまではわずかに上昇するのみで、その後減数第一分裂の完了後に急激に上昇した。
一方、以前キンギョ成熟卵cDNAライブラリーから単離した、生殖腺に特異的に発現している数種の未知のキナーゼcDNAについては、完全長のクローンを単離し、これらの遺伝子に対する組換えタンパク質を生産し、特異抗体を得ることができた。現在、これらを用いて生化学的な解析を行っている。
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