| Budget Amount *help |
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1995: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Research Abstract |
プロテインホスファターゼ2A(PP2A)は真核生物に広く分布するセリン・スレオニンホスファターゼである。ヒト赤血球のPP2Aは,34kDaの触媒サブユニット(α)と63kDa(β),53kDa(γ),74kDa(δ)の3種類の調節サブユニットから構成されており,α_1β_1,α_1β_1γ_1,α_1β_1δ_1の3種類のホロ酵素が存在する。74kDaのδは,この酵素の種々の基質に対する活性を抑制するが,Aキナーゼによりリン酸化されることによりその抑制作用が減弱する。本研究において,私たちはヒトPP2AのδサブユニットのcDNAを単離して,その一次構造を明らかにした。まず,ヒト赤血球よりδを純化し,その部分アミノ酸配列に基づいて,ヒト大脳皮質および骨髄のcDNAライブラリーからδをコードするcDNAを単離した。このcDNAの塩基配列から,δは570個のアミノ酸からなる分子量66万の蛋白質であると推定された。推定されたδの一次構造には,ウサギのPP2Aの52.5kDaのB′サブユニットおよびヒトのB56蛋白質との類似性が認められたが,PP2Aの他のサブユニットとの類似性は認められなかった。また,ホモロジー探査の結果,δが出芽酵母のRTS1(rox3サプレッサー)遺伝子産物ときわめて高い類似性を有することがわかった。δにはAキナーゼ,Cキナーゼによるリン酸化のコンセンサス配列が存在し,N末端付近にはプロリン,グルタミンの繰り返し配列,C末端付近には核移行シグナルのコンセンサス配列,およびSH3ドメインとの結合サイトのコンセンサス配列が存在した。ラットの各組織におけるδのmRNAの発現をノーザン・ブロット方により検討したところ,脳,心,肝,脾,骨格筋など検索したすべての組織において約2.9kbのmRNAの発現を認めた。
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