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デヒドロエピアンドロステロンレセプターのcDNAクローニング

Research Project

Project/Area Number 07770831
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 内分泌・代謝学
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

岡部 泰二郎  九州大学, 医学部, 助手 (40264030)

Project Period (FY) 1995
Project Status Completed (Fiscal Year 1995)
Budget Amount *help
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1995: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
KeywordsDHEA / DHEAレセプター
Research Abstract

1.DHEAレセプターがステロイドレセプタースーパーファミリーに属すると仮定した場合のstrategy
1)DEHAレセプターを高発現した活性化PEER細胞より抽出したRNAから作製した一本鎖cDNAを鋳型として、C19,C21のステロイドレセプターサブファミリーのP box,D box部分のアミノ酸をコードするdegenerate primerを用いてPCRにて増幅した。増幅したDNA産物をプラスミドに組み込み、22個のクローンをランダムにシークエンスしたが、11個がグルココルチコイコレセプター、2個がミネラルコルチコイドレセプター、残りはアーチファクトであった。
2)ヒトPPARγのDNA結合領域をプローブにして、活性化PEER細胞により作製したcDNAライブラリーをスクリーニングし、nur77ファミリーに属する新しいcDNAをクローニングした。全長cDNAを線維芽細胞に高発現させDHEA結合活性を調べたが、DHEA結合活性は検出できなかった。
2.DHEAレセプターがスエロイドレセプタースーパーファミリーに属さない場合のstrategy活性化PEER細胞より作製したexpression library約90、000個を、500個ずつのプールに分け、COS7細胞にtransfect後、DHEA結合活性をBAS2000のimage analyserを用いて解析したが、ポジティブなクローンを得ることはできなかった。
3.今後の方針
現在、DHEA結合活性のあるものとないものを差を、differential display法、cDNA subtraction法にて解析している。

Report

(1 results)
  • 1995 Annual Research Report
  • Research Products

    (1 results)

All Other

All Publications (1 results)

  • [Publications] 岡部 泰二郎: "Up-regulation of high-affinity dehydroepiandrosterone binding activity by dehydroepiandrosterone in activated human T lymphocytes." J.Clin.Endocrinol.Meteb.80. 2993-2996 (1995)

    • Related Report
      1995 Annual Research Report

URL: 

Published: 1995-04-01   Modified: 2016-04-21  

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