歯周病原菌貧食における歯肉線維芽細胞の食菌促進作用

• Project/Area Number: 07771642
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Morphological basic dentistry
• Research Institution: The Nippon Dental University
• Principal Investigator: 鈴木 安里 日本歯科大学, 新潟歯学部, 助手 (00196792)
• Project Period (FY): 1995
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1995)
• Budget Amount: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000); Fiscal Year 1995: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
• Keywords: Porphyromonas gingivalis / 歯肉線維芽細胞 / プロテアーゼ / 食菌阻害 / 血清 / プロテアーゼインヒビター / Fibronectin

Research Abstract

歯周病原菌であるP.gingivalis(P.g)は、食作用に抵抗性を示すが、歯肉線維芽細胞(Gin-1)や血清の存在が食細胞機能を助け、この食菌阻害を克服させると考えられる。P.gのもつ食菌阻止因子であるプロテアーゼと、Gin-1と血清の食菌促進因子との相互関係を明確にするため、P.gを種々の条件下で多形核白血球(PMN)と反応させ、食菌率を比較し、電顕観察を行なった。
1,食菌阻害に対するP.gプロテアーゼの影響をみるため、食菌反応系へそのインヒビターであるαPI,α_2M,PMSFを添加したところ、PMN細胞付着は改善されたが、細胞内取込を増加させることはできなかった。これは熱処理によってP.gを不活化した系においても同様であった。しかし血清と組み合わせることによって、α_2MとPMSFは、50%程度菌の取込を改善した。
2,食菌に促進的に働くと考えられる因子のうち(1)血清成分の影響をみるため抗体およびFibronectin(FN)の吸着血清、補体非働化血清を添加した系においてそれぞれ、25%、32%、45%の菌の取込減少がみられた。また(2)Gin-1の食菌促進因子について、P.gによる表層蛋白の変化をSDSPAGEとオートラジオグラフィーにより検討したところ、FNのバンドの消失がみられた。
さらに電顕観察で、Gin-1も血清も存在しない系のPMNはほとんど球形のままで、細胞、血清の存在により、PMNの儀足進展、付着、平坦化による歯のはきこみがおこることがわかった。
以上の結果よりP.gはトリプシン様酵素、コラゲナーゼによりそれぞれPMNの抗体、補体のレセプターを阻害し、付着、取込を妨げ、さらにGin-1のFNを分解していわゆるsurface phagocytosisも阻害することが示された。このため血清によるレセプター保護、抗体補体の供給、Gin-1によるPMNの足場提示は食菌阻害の克服に不可欠であることがわかった。さらにGin-1のPMN機能に対する影響を検討したい。