P.gingivalis LPSによるB細胞内チロシンリン酸化反応とLPS受容体

• Project/Area Number: 07807167
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Morphological basic dentistry
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 木村 重信 大阪大学, 歯学部, 講師 (10177917)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤原 卓 大阪大学, 歯学部・附属病院, 講師 (00228975)
• Project Period (FY): 1995
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1995)
• Budget Amount: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000); Fiscal Year 1995: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: Porphyromonas gingivalis / 内毒素 / B細胞 / チロシンリン酸化反応 / LPS受容体 / シグナル伝達

Research Abstract

本研究ではPorphyromonas gingivalisの歯周病原特異性をその内毒素(LPS)によるB細胞活性化機構という面から明らかにすることを目的に,マウスB細胞上のP.gingivalis LPS (PgLPS)の受容体の検索を行うとともに,LPS刺激後のB細胞内基質タンパクのチロシンリン酸化反応に関して大腸菌由来のLPS (EcLPS)と比較検討した.以下に,集積された結果を列記した.
1.分離・精製したPgLPSを用いて,脾臓B細胞を対象にフローサイトメトリーによる検討を行った結果,PgLPSに対する結合部位がマウス脾臓B細胞上に存在することが明らかとなった.さらにこの結合部位の発現は脾臓リンパ球の培養とともにupregulateされることが強く示唆された.
PgLPS刺激後のB細胞内チロシンリン酸化反応を検討した結果,PgLPS刺激によりチロシン残基が特異的にリン酸化される基質タンパクがマウス脾臓B細胞中に存在することが明らかとなった.今回の成績からは,分子量26.0kDaおよび24.8kDaの少なくとも2つの基質タンパクがB細胞膜画分中に存在すること,またこれらの基質タンパクはC3H/HeJ (EcLPSに非応答性)およびC3H/HeN(応答性)マウスに共通して存在することが強く示唆された.
3.EcLPSの刺激では,C3H/HeNマウスのB細胞膜画分には特異的リン酸化基質タンパクが認められたが,C3H/HeJマウスB細胞では検出されなかった.
4.EcLPSの刺激後C3H/HeNで認められたリン酸化基質タンパクのバンドは,PgLPS刺激後認められたリン酸化基質タンパクのバンドと一致することから,異なるLPS刺激によってもB細胞内では同一の経路を介してシグナル伝達が行われていることが強く示唆された.

Research Products

• [Publications] S.Kimura: "Tyrosine protein phosphorylation in murine B lymphocytes by Stimulation with lipcpolysaccharide from Porphyromonas gingivalis" FEMS Microbiology Letters. 130. 1-6 (1995)