エリスロポエチン受容体mRNAのalternative splicing機構

Research Project

Project/Area Number	07857074
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Hematology
Research Institution	University of Tsukuba
Principal Investigator	中村幸夫筑波大学, 基礎医学系, 講師 (60231479)
Project Period (FY)	1995
Project Status	Completed (Fiscal Year 1995)
Budget Amount *help	¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000) Fiscal Year 1995: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywords	赤血球 / エリスロポエチン / 受容体 / 細胞内領域欠損型 / 選択的スプライシング / RNA結合蛋白質
Research Abstract	エリスロポエチン受容体(EPOR)には,mRNAの選択的スプライシング機構によって複数の異なる受容体が存在する。完全長型(F型)、可溶型(S型)、細胞内領域欠損型(T型)の三種類である。このうちF型とT型とが生理的に発現している受容体のほとんどを占めている。F型受容体からは増殖・分化・アポトーシス抑制シグナルなどが伝達されることが知られている。T型はF型と共存することによってF型からのこれらのシグナル伝達を阻害する作用を有しており、赤血球産生調節機構に深く関わっている可能性が大きい(中村等、Science 257: 1138-1141,1992)。T型受容体をコードするmRNAでは、F型ではスプライスアウトされているイントロン7がスプライスアウトされずに残存しており、これによってイントロン7の内に終止コドンが現れる。イントロン7のスプライシングには特異的な調節機構が存在し、それがF型とT型の発現を調節しているものと考えられる。Ba/F3細胞にイントロン7を含むEPORのmRNAを発現させると、約半分のmRNAからは普遍的因子の作用でイントロン7がスプライスアウトされるが、残りは何等かの細胞特異的阻害因子によってスプライスアウトを免れた(中村等、Science264: 588-589,1994)。Ba/F3細胞より抽出した核蛋白とmRNAとを反応させた際のスプライスの程度と、Ba/F3およびHeLa細胞からの核蛋白をいろいろな比で混在させてmRNAと反応させた際のスプライスの程度とでは、有為差は検出されなかった。今後さらにいくつかの赤血球系細胞株を用いて、同様な実験を試みていく予定である。