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発光蛋白質エクオリン生物発光における超分子構造

Research Project

Project/Area Number 08219212
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionThe University of Electro-Communications

Principal Investigator

大橋 守  電気通信大学, 電気通信学部, 教授 (70015535)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 平野 誉  電気通信大学, 電気通信学部, 講師 (20238380)
Project Period (FY) 1996
Project Status Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Keywords生物発光 / 化学発光 / エクオリン / GFP / エネルギー移動 / イミダゾロン / シス-トランス異性化 / 蛍光
Research Abstract

オワンクラゲの生物発光は発光蛋白質エクオリンがカルシウムイオンにより刺激されて励起青色蛍光蛋白質(BFP)を生じ、ついで緑色蛍光蛋白質(GFP)にエネルギー移動して励起GFPを生じ、そこから発光極大510nmの緑黄色蛍光に由来するものといわれている。本研究では変性GFPやGFPを酵素分解して得たクロモペプチドが蛍光を示さないことから、生体内における蛍光量子収率が80%という高収率を理解するためにそのモデル化合物を合成し、蛍光挙動を比較検討した。合成したモデル化合物4-(4-hydroxyphenyl)methylideneimidazol-5-one(I)は溶液中では殆ど蛍光を示さないが77KでEtOH中剛体マトリクスでは470nm付近に強い蛍光を示した。同様に天然から得られたクロモペプチドもEtOH剛体マトリクス中で蛍光を示すようになり、その極大はモデル化合物(I)と一致した。(I)は光照射により側技のシス-トランス異性化をおこすことも明らかにした。このことはGFP中では分子内水素結合やクロモフォアの存在するキャビティのためにシス-トランス異性化が阻害されることにより高量子収率の蛍光を示すものと解釈しうることを示した。GFPは又亜ジチオン酸ナトリウムで還元すると蛍光を失い、空気酸化で再生することが知られている。モデル化合物(I)は亜ジチオン酸ナトリウムでジヒドロ化合物を与え、もはや蛍光を生じないが、このものは空気酸素存在下で再び(I)が再生されることを見出した。このことはGFPの生合成に対して重要な知見を与える結果である。

Report

(1 results)
  • 1996 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Tatsuki Matsuno: "Mass Spectrometric Investigation of Structures of Intermediates in Acridine Chemiluminescence" J.Mass Spectrom.Soc.Jpn.44.2. 175-181 (1996)

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      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Yoshihiro Ohmiya: "The structural origin of the color differences in the bioluminescence of firefly luciferase" FEBS Lett.384. 83-86 (1996)

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      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Haruki Niwa: "Chemical nature of the light emitter of the aequorea green fluorescent protein" Proc.Natl. Acad.Sci.USA. 93.11. 13617-13622 (1996)

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  • [Publications] Ryo Saito: "Solvent and Substitution Effects on the Fluorescent Properties of Coelenteramide Analogues" J.Chem.Soc.,Perkin Trans.2. (in press). (1997)

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      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Satoshi Kojima: "Mechanism of the Redox Reaction of the Aequorea Green Fluorecent Protein" Tetrahedron Lett.(in press). (1997)

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      1996 Annual Research Report

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Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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