エリスロポエチン受容体からのJAK2活性化を介した細胞内情報伝達機構の解析

Research Project

Project/Area Number	08261205
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Tokyo Medical and Dental University
Principal Investigator	三浦修東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (10209710)
Project Period (FY)	1996
Project Status	Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help	¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000) Fiscal Year 1996: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywords	エリスロポエチン / JAK2 / STAT5 / チロシンリン酸化
Research Abstract	免疫や造血機能を調節する多くのサイトカインの受容体は,JAKファミリーの細胞内チロシンキナーゼを活性化し,転写調節因子STATのチロシンリン酸化による活性化をもたらす.そこで,私達は,エポ受容体を含めたサイトカイン受容体からの増殖シグナル伝達おけるJAK2の意義を検討する目的で,上皮増殖因子(EGF)受容体の細胞外領域とJAK2のチロシンキナーゼ領域との融合体を作成し造血細胞に発現させて検討を行い,JAK2には直接的にSTAT5の活性化と細胞増殖を誘導する能力があることを示し,サイトカイン受容体からのシグナル伝達におけるJAK2・STAT5経路活性化の意義を確定した(Nakamura,N.et al.J Biol Chem 271:19483-19488,1996).また,私達は,エポ受容体とJAK2がどのような機構によりSTAT5を特異的に活性化するかを検討し,STAT5はエポ刺激によりチロシンリン酸化されたエポ受容体に一過性に結合することを見出した.この結合は,リン酸化チロシンと特異的な結合能を有するSTAT5のSH2領域と,エポ受容体の344番目等のチロシンとの間の特異的な結合によることが,種々のエポ受容体およびSTAT5の変異体を用いた培養細胞での発現実験やリコンビナント蛋白を用いた結合実験の結果より明らかになった(Chin,H.et al.Blood 88:4415-4425,1996).さらに私達は,エポ刺激によりIL-3受容体のβ鎖がチロシンリン酸化を受けSTAT5と結合することや,STAT5の活性化に必要な694番目のチロシンを置換した変異体はIL-3受容体に持続的に結合し,IL-3によるSTAT5の活性化を阻害することを最近見出した.(Chin,H.et al.Blood 印刷中).