| Project/Area Number |
08275203
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
高橋 智 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (50271896)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 雅之 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (50166823)
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| Project Period (FY) |
1996
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | GATA-1 / セルトリ細胞 / 転写因子 / 精子形成 |
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| Research Abstract |
[研究成果]今年度の研究の成果として以下の点があげられる。
精巣特異的GATA-1プロモーターの機能解析:トランスジェニックマウスの系を用いて、GATA-1遺伝子の精巣特異的な発現に必要なエレメント、さらには周期的な発現に必要なエレメントを同定を試みた。様々なGATA-1の制御領域断片にレポーター遺伝子を結合したトランスジーンを作成し、それらを用いてトランスジェニックマウスを作成した。そのうちの1つのラインで精巣にレポーター遺伝子の発現を認めた。さらに、そのラインでは精巣での周期的な発現も確認された。他のトランスジェニックマウスラインも含めた解析より、精巣特異的な発現および周期的な発現には、精巣特異的な第1エクソンの上流領域だけでは十分でなく、第1エクソンの下流域に必須なエレメントがあることが明らかとなった。
プロモーター特異的なターゲティングマウスの作製:精巣特異的なプロモーターのみで精子形成が支持できるかどうかを知る目的で、血球特異的なプロモーターのターゲティングを行った。GATA-1遺伝子はX染色体上に存在し、通常のES細胞では1コピーのみ存在する。以前報告されたGATA-1完全欠損ES細胞からは生殖細胞キメラが得られなかったが、赤血球特異的プロモーターのみをターゲティングしたES細胞からは生殖細胞キメラが形成され、ターゲティングアレルが効率良く次世代に伝達された。ターゲティングアレルを有するヘテロ雌マウスでは様々な程度の貧血が見られ、雄マウスは著明な貧血のため胎生致死であった。我々のターゲティング法では、生殖細胞キメラが容易に形成されたことより精巣型プロモーター単独で精子形成を支持できることが示唆された。
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