| Project/Area Number |
08275212
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
岡田 典弘 東京工業大学, 生命理工学部・生体機構学科, 教授 (60132982)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村田 成範 東京工業大学, 生命理工学部・生体機構学科, 教務職員 (80280999)
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| Project Period (FY) |
1996
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
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| Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Keywords | RNA / SINE / ウナギ / 逆転写酵素 / アミノ酸 / 塩基配列 / PCR法 |
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| Research Abstract |
生殖細胞中でRNAを介した転移因子が、実際に転移する現象は未だ報告されておらず、精巣分化過程を人為的に制御できるウナギの精巣を用いることで、SINEの転写及び、逆転写の機構が解明されれば、他に類のない画期的な報告ができるものと考え、次の通り実験を行った。
ウナギのSINE配列を含んだDNA断片を単離して、塩基配列を決定、ウナギ精巣の各分化段階におけるSINEユニットの転写産物の存在を、ラジオアイソトープ存在下でのプライマー伸長反応を反応産物の電気泳動により検出した。また各分化段階のサンプルより粗タンパク質を抽出して、逆転写酵素活性測定を行い発現時期を特定、その活性を指標として逆転写酵素の精製を進め、アミノ酸の部分配列を決定、その配列より類推される塩基配列をプライマーとしてPCR法により逆転写酵素遺伝子の塩基配列を決定した。
実験は現在も進行中であり、中にはサンプルを取り寄せている最中のものもあり、今後様々なデータも今後増えることが予想され、引き続き検討を加えていくことが必要である。
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