アルツハイマー病アミロイド前駆体タンパク質代謝酵素の解析

• Project/Area Number: 08278236
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: Okazaki National Research Institutes
• Principal Investigator: 丸山 敬 岡崎国立共同研究機構, 生理学研究所, 助教授 (30211577)
• Project Period (FY): 1996
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1996)
• Budget Amount: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000); Fiscal Year 1996: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
• Keywords: アルツハイマー病 / アミロイド前駆体 / セクレターゼ / Two-Hybrid法 / アニオントランスポータ

Research Abstract

アルツハイマー病(AD)の病因の一つとして、アミロイド前駆体タンパク質(APP)の代謝異常によるβ/A4タンパク質(Aβ)の蓄積が考えられている。神経毒性を持ったAβによって、神経細胞が変成するというものである。このAPPの特徴的な代謝系として分泌系が存在する。以前よりの研究により、APPの分泌系は単純な水溶性プロテアーゼではなく、膜に埋め込まれた複合体であることが明らかになりつつある。このような複雑な複合体の同定は、通常の蛋白質生化学的方法では非常に困難である。そこでAPPのAβを含むC末側を発現させ、Two-hybrid法による結合タンパク質のクローニングを試みた。確実な結合の確認にはさらに実験が必要であるが、アニオントランスポーターが弱い結合を示すクローンとして得られた。このタンパク質は膜貫領域を数個もち、立体構造はpresenilinと類似している。しかし、APPとCOS細胞での共発現では、その代謝に影響を及ぼさなかった。Two-Hybrid法におけるタンパク質の結合は細胞質(核質)で行われるものであり、水溶性タンパク質の結合の検定に適している。膜タンパク質間の相互作用の検定は困難と考えられた。
家族性ADで見いだされているVal717変異はAβ42を増やすことが報告されている。そこでVal717をCys,Glu,Serなどに変異してAPPの代謝を検討した。Aβ42を増やすのは家族性ADで見いだされている変異のみだった。しかし、他の変異はα分泌に影響を及ぼした。

Research Products

• [Publications] Maruyuama,Kei et al.: "Familial Alzheimer′s disease-linked mutations at Val717 of amyloid precursor protein are specific for the increased secretion of Aβ42(43)" Biochem.Biophys.Res.Commun.227. 730-735 (1996)
• [Publications] Maruyama,Kei et al.: "The presenilin 2 mutation (N141l) linked to familial Alzheimer′s disease (Volga German families) increases the secretion of amyloid β protein ending at Aβ42(43)." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1997)