分子シャペロン、ストレス蛋白質の抗原処理、提示機構における役割り
| Project/Area Number |
08282231
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Institution | Sapporo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
佐藤 昇志 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (50158937)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
菊地 浩吉 札幌医科大学, 医学部, 教授 (00045345)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1996
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
|
| Budget Amount *help |
¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
|
|---|
| Keywords | hsp / 抗原ペプチド / TAP / MHC class I / ER / DSG |
|---|
| Research Abstract |
1)hsc70とTAP分子の会合
T1細胞を可溶化し、抗TAP抗体(Dr.Crosswellより供与)で免疫沈殿物を作製、SDS-PAGE後ウェスタンブロットし、抗hsc70抗体(3a3抗体)で会合の有無を決定した。その結果、抗TAP抗体免疫沈殿物の分子量70kDa付近に3a3で検出されるバンドが明らかに認められた。つまり、TAP分子はhsc70と複合体を形成していることが判明した。解離されることも判明した。さらにこの会合はhsc70と選択的に反応する薬剤として知られているmethyl deoxyspergualin (meDSG)により完全に阻害された。従って、hsc70とTAP分子の結合はmeDSGがhsc70に結合する部分を介しての会合と推測することができる。
2)hsc70による抗原ペプチドのERへの移入増強
tyrosinase抗原ペプチドTyr-Met-Asn-Gly-Thr-Met-Ser-Gln-ValはTyrで^<125>Iラベルを行った。このペプチドがERに移入されたことの指標はAsn-Gly-ThrのモチーフがER内でglycosylationされることを利用し、ConAのaffinity columnを利用しglycosylated peptideとして精製し、^<125>I-Tyrの放射活性で定量化した。ERのソースとしてはラビットのreticulocyte microsome fractionを使用した。その結果、hsc70添加によりtyrosinase抗原ペプチドのERへの移入がBSAに比し、2倍近く明らかに増強した。このことはhsc70が自身の基質結合部に結合する抗原ペプチドをTAP分子を介しERに効率的に移入する機能をもつことを示している。
|
Report
(1 results)
Research Products
(8 results)
-
[Publications] Takashima,S.,Sato,N.,Kishi,A,Tamura,Y.,Sagae,S.,Kudo,R.,Torigoe,N,Yagihashi,A.,and Kikuchi K.: "Interaction between cell-surface expressed 70kDa heat shock protein-like antigen and CD3^+4^-8^- TCR α/β kller T cells." Art.Organs. 20. 857-861 (1996)
-
[Publications] Ikeda,H.,Sato,N.,Matsuura,A.,Sasaki,A.,Takahashi,S.,Kozutsumi,D.,Kobota,T.,Okumura,N.Wada,Y.,Hirata,K.,Sato,N.and Kikuchi,K.: "Clonal dominance of human autologous cytotoxic Tlymphocytes against gastric carcinoma : molecular stability of the CDR-3 structure of TCR α/β gene." Int.Immunol. 8. 75-82 (1996)
-
[Publications] Tamura,Y.,Takashima,S.,Cho,J-M,Qi,W.,Kamiguchi,K,Torigoe,T.,Takahashi,S.,Hirai,I.,S,N.and Kikuchi,K.: "Inhibition of natural killer cell cytotoxicity by cell growth-related molecules." Jap.J.Cancer Res.87. 623-630 (1996)
-
-
[Publications] Miyazaki,A.,Sato,N.,Takahashi,S.,Sasaki,A.,Kohama,G.,Yamaguchi,A.,Yagihashi,and Kikuchi,K.: "The mechanism of the cytotoxicity of CD4+killer T cell lines against human autologous squamous cell carcinoma of the tongue." Jpn.J.Cancer Res.(in press).
-
[Publications] Sahara,H.,Ishikawa,M.,Takahashi,N.,Ohtani,S.,Sato,N.,Gasa,S.,Akino.T,and Kikuchi,K.: "in vivo antitum of effect of 3-sullono Quinovosyl 1'-monoacyiglyceride,isolated from sea urchin (Strongyloventrotus intermedius) intestines." Brit.J.Cancer. 75. 324-332 (1996)
-
-
