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ポルフィリン誘導体を用いた微弱蛍光顕微分光法による喀痰中癌細胞識別装置の開発

Research Project

Project/Area Number 08557042
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section展開研究
Research Field Respiratory organ internal medicine
Research InstitutionKanazawa Medical University

Principal Investigator

高橋 敬治  金沢医科大学, 医学部, 教授 (50004685)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 長内 和弘  金沢医科大学, 医学部, 講師 (70221158)
黄 正寿 (黄 正壽)  金沢医科大学, 医学部, 講師 (20139778)
Project Period (FY) 1996 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥9,600,000 (Direct Cost: ¥9,600,000)
Fiscal Year 1998: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥7,200,000 (Direct Cost: ¥7,200,000)
Keywords喀痰細胞診 / ポルフィリン誘導体 / 肺癌細胞 / 蛍光顕微分光法 / 癌細胞識別装置 / 癌細胞識別 / 蛍光顕微分光
Research Abstract

[目的] 臓器別癌死亡率の第一位を占める肺癌の対策として、早期発見による、早期手術が求められる。本研究はハイリスク患者の集団検診を実施可能とする喀痰中癌細胞自動識別装置の開発を目的とした。[結果]1)測定条件の設定 ポルフィリン誘導体(PH1008)(HPD)の正常細胞と肺癌細胞の識別に適性な励起波長は395±5nm,蛍光波長633nm,HPD濃度0.1μg/mlであった。2)細胞処理条件の検討 肺癌細胞樹立株A549細胞を用いてHPD濃度と細胞生存率の関係を検討し、37℃10分間処理条件では濃度5μg/mlまでは生存率80%であり、反応時間は0〜10分以内で十分であり、蛍光強度は生細胞数に依存しない。3)細胞種による蛍光強度 各種肺癌細胞株(腺癌:A549,LCSC#1,扁平上皮癌:EBC-1および小細胞癌:LU65),ヒト正常細胞として肺線維芽細胞、B7XLS細胞、好中球、単球をコントロールとしてこれらを一定時間培養後に単離し、HPDと反応させ、微弱蛍光カメラにより細胞の蛍光強度を比較検討した。扁平上皮癌、小細胞癌、腺癌の順に強い蛍光強度を示したが、線維芽細胞も僅かに蛍光が観察された。しかし、BAL液細胞、好中球、単球の蛍光強度は無視できる程度であった。生標本、アルコール固定標本共に正常細胞と各種癌細胞間の蛍光強度の差が認められたが、生標本とアルコール固定標本間においては蛍光強度の差は僅かであった。[考察] 以上平成10年度まで実用化を目指したが、実用化段階でその識別のための感度、特異性などとの関連で、微弱蛍光カメラ(CCDカメラ)の特性、喀痰処理、HPDに関して更に検討すべき事項が残された。

Report

(3 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • 1996 Annual Research Report

Research Products

(15 results)

All Other

All Publications (15 results)

  • [Publications] A.Suwabe: "Protective roles of lung surfactant on neutrophil-mediated lung injury." J.Jpn.Med.Soc.Biol.Interface. 26(Suppl). 67-88 (1996)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] K.Iwabuchi: "Characterization of carcinoma cells ex vivo LASER-excited fluoroscopy using a newly symthesized porphyrin derivative PH1008." Yamagata Medical J. 15(2). 65-75 (1997)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] A.Suwabe: "Artificial surfactant(Surfactant TA)modulates adherence and superoxide production of neutrophils." Am J Respir Crit Care Med.158. 1890-1899 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] T.Sakuma: "Serum KL-6,a novel mucin-like glycoprotein,as indicator of interstitial pneumonitis following lobectomy." Surg.Today Jpn J Surg.29. 121-128 (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] T.Sakuma: "Ischemia-reperfusion lung injury in rabbits:mechanisms of injury and protection." Am.J.Physiol.(Lung Cell.Mol.Physiol.). 20. L137-L145 (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] G.H.Yang: "Effects of interleukin-1 β on DNA synthesis in rat alveolar type II cells in primary culture." Respirology. (発表予定). (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 楊 観虎ほか: "癌細胞増殖シグナル伝達機構に及ぼす高濃度EGFとシスプラチン併用の影響-EGF受容体チロシンキナーゼについて" 日胸疾会誌. 34(3). 267 (1996)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Keiji Takahashi,et al.: "Alveolar type II cells inducible NO synthase in rat endotoxininduced lung injury." Am.J.Respir.Crit.Care Med.155(4). A827 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 長内 和弘 ほか.: "ラット単離培養肺胞II型細胞における新合成サーファクタントプロテインAの輸送" 日界面医誌. 28(1・2). 63-65 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] K.Osanai,et al.: "Interleukin-1 β stimulates proliferation of rat alveolar type II cells in primary culture." Am.J.Respir.Crit.Care Med.155(4). A750 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 岡崎 浩 ほか.: "ポルフィリン誘導体による喀痰中癌細胞の識別に関する研究" 日呼吸会誌. 36(3). 220 (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] K.Iwabuchi: "Characterization of carcinoma cells ex vivo on LASER-excited flioroscopy using a newly synthesized porphyrin derivativc PH1008." Bulletin of Yamagata University (Medical Science). (発表予定).

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] 長内和弘: "初代培養ラット肺胞II型上皮細胞における新合成フォスファチジ-ルコリンの層状封入体への細胞内輸送におけるゴルジ装置の役割" 日本界面医学会雑誌. 27(1,2). 57-61 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] A.Suwabe: "Protective roles of lung surfactant on neutrophil-mediated lung injury." J. Jpn. Med. Soc. Biol. Interface. 26(Suppl). 67-88 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] 諏訪部章: "ラット肺胞II型細胞の好中球スーパーオキサイド産生に対する抑制効果" 日胸疾会誌. 34(10). 1104-1108 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report

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Published: 1996-03-31   Modified: 2016-04-21  

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