| Project/Area Number |
08671161
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
内分泌・代謝学
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
加治 秀介 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (90224401)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
千原 和夫 神戸大学, 医学部, 教授 (00107955)
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| Project Period (FY) |
1996
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
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| Keywords | 成長ホルモン / 成長ホルモン遺伝子 / 成長ホルモン結合蛋白(GHBP) / 成長ホルモン受容体遺伝子 / 成長障害 / インスリン様成長因子(IGF-1) |
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| Research Abstract |
1.不活性型GHの病態解析
臨床的に不活性型GHが疑われた症例のGH遺伝子にヘテロのミスセンス変異(D112G)を認め、蛋白レベルでは変異型GHが優位に発現していた。GST融合蛋白として大腸菌で作成した変異GHとGH結合蛋白(GHBP)とのcomplexの分子量はHPLCの結果1:1で野性型GH-GHBPの1:2と比較してダイマー化の障害が示唆された。変異GHではIM9細胞でのGH受容体(GHR),JAK2,STAT5のリン酸化の低下と、GHR細胞外ドメイン、thrombopoietin受容体細胞質ドメインのキメラcDNAを導入したBaF/3-GM細胞での代謝反応の低下を認めた。
2.GHR異常症の病態解析
(A)G724Tと981Cの1塩基欠失(981C-del)を認めた複合ヘテロ例の父と兄には981C-del、母にはG724TをPCR-direct sequence,PCR-RFLPで確認した。父のリンパ球よりGHR mRNAをRT-PCR、direct sequenceしたところ正常GHRのみ発現していた。G724Tは発現しても細胞外ドメインの一部で(E224X)、981C-delは十分に発現しないとすれば本症例の高度の成長障害(-7.6SD)と血中GHBP低値(検出感度以下)は説明しうる。
(B)GH不応性とGHBP高値(896,871 pmol/l)を呈した低身長(-3.0,-3.5 SD)兄妹例でGHRイントロン9のsplice donor siteにGからAへのヘテロの変異を認めた。母と兄妹のリンパ球GHR mRNAはRT-PCR,direct sequenceよりexon9のskipとframe shiftによりexon10では3アミノ酸が置換された後、終止コドンとなった。今後本例ではヘテロでの発症とGHBP高値の原因解明のため変異GHRを作成し、in vitroでの検討が必要である。
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