| Project/Area Number |
08671254
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
Hematology
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
三室 淳 自治医科大学, 医学部, 講師 (10221607)
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| Project Period (FY) |
1996
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
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| Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 1996: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
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| Keywords | plasminogen activator inhibitor / fibrinolysis / gene targeting |
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| Research Abstract |
線溶制御因子Plasminogen activator inhibitor 2(PAI-2)の生理的役割を検討するために、mouse PAI-2のcDNAと遺伝子をクローニングし、また、mouse PAI-2 mRNAとPAI-2分子の発現を検討した。その結果PAI-2は種々の皮膚や腹膜中皮細胞などの表皮細胞とマクロファージに発現が認められ、その結果を報告した(Thromb Haemost 76,569-576,1996)。さらに、実験計画に従ってPAI-2 nock out mouse作製をすすめた。マウスPAI-2遺伝子の一部をhomogolous recombinationにより削除するために、三種類のTargeting vectorを構築した。Targeting vector ♯1はPAI-2遺伝子のexon VI^〜VIIIをNeomycin resistant gene(Neor)と置換するようにデザインし、5´、3´側に5.5kb、3.6kbのPAI-2遺伝子をもち、さらにHerpes simplex virus thymidine kinese gene(TK)をもつ。Targeting vector ♯2はPAI-2遺伝子のexon V^〜VIIIをNeorと置換するようにデザインし、5´、3´側に7kb、3.6kbのPAI-2遺伝子とTK geneをもつ。Targeting vector ♯3はPAI-2遺伝子のexon II(initiation codonを有する)をNeorと置換するようにデザインし、5´側、3´側に5.5kb、4.5kbのPAI-2遺伝子とTKをもつ。♯1 VectorをES細胞にelectroporation法でvectorを導入し、得られたNeo耐性クローンを解析中である。
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