着床初期過程における栄養膜細胞と子宮内膜との相互作用に関する研究

Research Project

Project/Area Number	08671875
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Section	一般
Research Field	Obstetrics and gynecology
Research Institution	Tokyo Medical and Dental University
Principal Investigator	清水康史 (1998) 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (80242197) 己斐秀樹 (1996-1997) 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (20280969)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	己斐秀樹東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (20280969) 久保田俊郎東京医科歯科大学, 医学部, 助教授 (50126223) 麻生武志東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (60093176) 中尾幸恵東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (50301156) 清水康史東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (80242197)
Project Period (FY)	1996 – 1998
Project Status	Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help	¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000) Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000) Fiscal Year 1997: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000) Fiscal Year 1996: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords	栄養膜細胞 / extravillous trophoblast / 浸潤 / matrix metalloproteinase / 着床 / トロンビン / 細胞内pH / Na^+ / H^+ antiporter / 子宮内膜 / 胚細胞 / H^+ exchamger / ITIM / レクチン / 胚盤胞 / H^+ exchanger / 培養マウス胚盤胞 / 細胞外基質
Research Abstract	着床・胎盤形成の過程では、調和のとれた栄養膜細胞の子宮への浸潤が不可欠であるが、その調整機構の詳細は不明である。ヒト初期絨毛から得られる絨毛外栄養膜細胞(extravillou trophoblast:EVT)およびマウスの胚盤胞より伸展する栄養膜細胞を用いて栄養膜細胞の伸展・浸潤の制御機構の解明を試みた。トロンビンレセプター(Protease-activated receptor1)がヒトにおいて子宮への浸潤が強い時期に一致し、脱落膜に浸潤する栄養膜細胞(EVT)に特異的に発現していた。われわれが初期絨卦り分離したEVTは、トロンビンレセプターを発現しており、Matrigel invasion assayによりトロンビンの添加によりEVTの浸潤能が促進されること、また定量的な解析によりそれらがmatrix metalloproteinaseの活性化によりもたらされていることを明らかになった。トロンビンがEVTの表面に発現するMT1MMPを誘導・活性化して、細胞表面でMMP2の活性化が起き浸潤が促進されている可能性が強く示唆された。一方、マウス胚盤胞の栄養膜伸展の過程では、Na^+/H^+ antiporterが機能していることが、選択的阻害剤の添加実験及び共焦点レーザー顕微鏡を用いての細胞内PHの測定の結果から明らかになった。伸展の過程で重要な細胞内のセカンドメッセンジャーとして機能していることが予想された。特に前者の実験系は、種差の問題が無く、ヒト着床の機構の解明に有用であり今後の発展が期待される。