機械的外力に応答するin vitroでの骨吸収実験系の確立

Research Project

Project/Area Number	08672374
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Single-year Grants
Section	一般
Research Field	矯正・小児・社会系歯学
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	谷村一朗徳島大学, 歯学部, 助手 (20253221)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山本照子徳島大学, 歯学部, 教授 (00127250) 岡田欣也徳島大学, 歯学部, 助手 (60274239)
Project Period (FY)	1996
Project Status	Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help	¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000) Fiscal Year 1996: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Keywords	破骨細胞 / 骨吸収 / 骨髄細胞培養系 / 機械的外力
Research Abstract	機械的外力に応答するin vitroでの骨吸収実験系の確立のために、以下のような実験を行った。まず、機械的外力を付加する装置の考案をした。これはII型コラーゲンで皮膜した弾性のある培養プレートを用いて、この底面を一定に伸展させることによって細胞に伸展力を付加するものである。生後3日目のマウスの頭蓋冠よりWangらの方法で骨芽細胞を分離し、これを前述のプレートに播種し、機械的伸展力を加えながら培養した。この骨芽細胞を培養したコンディションドメディウムを集めた。一方、7-9週齢のICRマウスの大腿骨および脛骨より骨髄細胞を採取し、培養して、副甲状腺ホルモン(PTH)を添加し、骨髄細胞から破骨細胞様多核細胞の形成を観察した。そこへ機械的伸展力を与えた骨芽細胞のコンディションドメディウムを添加すると、破骨細胞様多核細胞の形成が促進されることを見出した。このコンディションドメディウムは骨芽細胞がsubconfluentな状態で伸展刺激を与えたときにのみ多核細胞の形成を促進した。コンフルエント後の状態で伸展刺激を与えたときのコンディションドメディウムは逆に多核細胞の形成を抑制した。骨芽細胞の伸展培養にインドメタシンを加えた場合のコンディションドメディウムは、PTHが誘導するた多核細胞形成を抑制した。すなわち、この伸展刺激を行った骨芽細胞のコンディションドメディウムの多核細胞形成促進作用にはプロスタグランディンの関与が示唆された。機械的な刺激によって反応する骨吸収には、骨芽細胞系の細胞による調節機構が存在することが示唆された。今後はこの多核細胞に骨吸収能があるのかどうかを骨片による骨吸収実験を行って確認する必要があろうと思われる。また、骨芽細胞のこのコンディションドメディウム中の骨吸収促進活性の同定を行う必要があろう。