| Project/Area Number |
08680796
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Research Field |
Developmental biology
|
|---|
| Research Institution | Kumamoto University |
|---|
Principal Investigator |
安部 真一 熊本大学, 理学部, 教授 (90109637)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 卓 熊本大学, 理学部, 助手 (90244102)
高宗 和史 熊本大学, 理学部, 助教授 (20206882)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1996
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
|
| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
|
|---|
| Keywords | 精子分化 / 精原細胞 / 減数分裂開始 / 培養 / FSH / IGF-I / FSH recepter |
|---|
| Research Abstract |
精子分化過程における体細胞分裂を行う精原細胞から減数分裂を行う精母細胞への分化の機構という問題を研究するために、我々は、イモリの器官培養系や細胞培養系において、FSHの処理によってセルトリ細胞から出される増殖因子(あるいは減数分裂誘導因子)を同定し、そのシグナルを受けて精原細胞が増殖し、減数分裂が開始するメカニズムを解明することを目的とした。
(1)器官培養における種々の増殖因子の影響
精原細胞ステージの精巣断片を器官培養し、種々のヒトリコンビナント増殖因子を加え、1週間後にBrdUを取り込ませて精原細胞の増殖活性を調べた。コントロールでは1週間後約5%まで低下したが、FSHを加えた培地では、約35%と高い値を保っていた。コントロール培地にヒトIGF-Iを50ng/ml加えたところ、30%弱の増殖促進活性が見られた。2週間後分化率を調べると、FSH培地では約45%のシフトが第一精母細胞へ分化した。IGF-IはFSHよりは低いものの20%弱のシフトで分化した。
(2)イモリFSHリセプターcDNAの単離
精原細胞ステージの精巣断片から調整したRNAを鋳型として、哺乳類のFSHリセプターの細胞外ドメインの2カ所で設計したプライマーを用い、RT-PCRを行ったところ、831bpから成るcDNA cloneが得られた。ヒトのFSHリセプターと塩基レベルで約65%、アミノ酸レベルで約58%のホモロジーが見られた。
|
