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高感度円偏光二色性分光電気化学法の開発と金属タンパク質の構造変化速度解析への応用

Research Project

Project/Area Number 08750959
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 工業物理化学
Research InstitutionKumamoto University

Principal Investigator

西山 勝彦  熊本大学, 工学部, 講師 (10202243)

Project Period (FY) 1996
Project Status Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywords円偏光二色性分光法 / 分光電気化学 / チトクロムc / フェレドキシン / ミオグロビン / 機能修飾電極 / 磁気円偏光二色性分光法
Research Abstract

本研究では、金属タンパク質であるチトクロムc、フェレドキシンおよびミオグロビンに関して、その電気化学的酸化還元に伴う構造変化速度を検討するために新たに開発した分光電気化学セル及びデーター積算システムを備えた円二色性分光電気化学法を開発した。これまでにも金属タンパク質の速い電子移動のため、種々のプロモーター修飾電極を含む機能性電極が開発されているが、円二色性分光電気化学法という長時間の測定が必要となる手法では電極の安定性が重要な要因となり、結果的にチトクロムc、ミオグロビンの場合には酸化インジウム電極を、フェレドキシンの場合にはポリリジン修飾酸化インジウム電極を作用電極として用いた場合、タンパク質の電極への吸着がなく、経時変化の少ない応答が得られることが判明した。これらの金属タンパク質のミリ秒や秒オーダーの比較的遅い構造変化を捕らえるためにダブルポテンシャルステップ法を用い、酸化還元に伴う電気量の変化と円偏光二色性スペクトル(CD)あるいは磁気円偏光二色性スペクトル(MCD)と吸収スペクトルの変化を同時に測定した。CDシグナル、MCDシグナルは吸収スペクトルや電気量と比較してS/Nが非常に悪くデーターの積算が必要となるため、分光器とポテンシォスタットを同時に駆動し、データーの積算を自動的に行えるシステムを開発した。この装置によって、100ミリ秒オーダーの比較的遅い過程の構造変化を追跡すること可能となり、数千回の積算も容易に行えるようになった。しかしながら、今回用いた金属タンパク質では、酸化還元電位還元反応に伴う電気量の時間変化と吸収スペクトルの変化及びCDあるいはMCDシグナルの時間変化は全く同じ軌跡を辿り、この時間スケールでの電子移動よりも遅い構造変化は観測されなかった。

Report

(1 results)
  • 1996 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All Other

All Publications (2 results)

  • [Publications] I.Taniguchi,Y.Mie,and K.Nishiyama,et al.: "Electrochemistry of monoazahemin reconstituted myoglobin at an indium oxide electrode" J.Electroanalytical Chemistry. (in press.). (1997)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] I.Taniguchi,S.Yoshimoto,and K.Nishiyama: "Structural Dependence of Modifiers Adsorbed on Gold Single Crystal Surfaces on the Promotion of the Electrode Reaction of Cytochrome c" Chemistry Letters. (in press.). (1997)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report

URL: 

Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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