ヒトsmall maf遺伝子のクローニング

• Project/Area Number: 08770544
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 土岐 力 弘前大学, 医学部, 助手 (50195731)
• Project Period (FY): 1996
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1996)
• Budget Amount: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 1996: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: small maf / mafK / mafG

Research Abstract

【本研究の背景】組織特異的転写因子NF-E2は、巨核球と赤芽球の分化・成熟に、重要な働きをしている。その小サブユニットであるsmall maf原癌遺伝子ファミリーは、ロイシンジッパー・DNA結合タンパクをコードしているが、ヒトのホモログについては遺伝子構造が明らかになっていない。
【本研究の目的】ヒトのsmall maf転写因子をコードする遺伝子の単離と構造決定および、遺伝子座を決定すること。
【研究によって得られた知見・成果】
[1.ヒトsmall maf転写因子群の遺伝子の単離]
まず、ヒトmafKおよびmafGのcDNAを単離した。これをもとに、PCR用プライマーをデザインし、P1ファージ・ヒト遺伝子ライブラリーをPCR法でスクリーニングし、mafKおよびmafGの遺伝子を単離することができた。
mafK、mafGともにORFは第二・三エクソンに存在し、非翻訳領域のみからなる第一エクソンは第二エクソンより、mafKで約8kb,mafGで約4.5kb上流に存在することを明らかにした。
[2.ヒトsmall maf転写因子群の遺伝子座の決定]
得られた遺伝子をプローブとして、FISH法にて、mafKは第7番染色体短腕に、mafGは17番染色体長腕に存在することを明らかにした。
[3.各small maf転写因子のプロモーターの解析]
赤芽球系および巨核球系の分化に伴って、mafKのプロモーターの活性化が認められた。プロモーターの構造との関係は、現在検索中である。