先天性ケトン体代謝,脂肪酸β酸化系異常症の酸素診断と分子病態解析

• Project/Area Number: 08770554
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 深尾 敏幸 岐阜大学, 医学部・附属病院, 助手 (70260578)
• Project Period (FY): 1996
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1996)
• Budget Amount: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 1996: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: 先天代謝異常症 / 遺伝子変異 / チオラーゼ / CoAトランスフェラーゼ / ケトン体 / 脂肪酸β酸化 / アシル-CoAデヒドロゲナーゼ

Research Abstract

本年度先天性ケトン体代謝異常症のβ-ケトチオラーゼ欠損症(T2欠損症),サクシニル-CoA:3-ケト酸CoAトランスフェラーゼ(SCOT)欠損症,細胞質チオラーゼ(CT)欠損症および脂肪酸β酸化系異常症の極長鎖アシル-CoA脱水素酵素欠損症について酵素診断,病態解析を行った.先天性ケトン体代謝異常症の患者スクリーニング:3疾患について,乳児期より重篤なケトーシス発作が繰り返す症例について,活性測定,蛋白解析を行ったが,オランダの症例がT2欠損症であると診断できたが,他の所を例では3疾患は否定された.SCOT欠損症の解析:SCOTcDNAのクローニング,染色体座位を決定し,また1例の遺伝子変異を同定してAm J Hum Genetに発表した.またcDNAを大腸菌で発現させ,精製して抗体を作成し,線維芽細胞やリンパ球を用いたイムノプロットを行い,診断に有用であることを明らかにし,Biochim Biophys Actaに発表した.現在SCOT遺伝子をクローニング中である.日本およびオランダの症例の遺伝子解析も現在進行中である.T2欠損症の解析:現在までに当教室で27例が本症と診断され,蛋白質遺伝子解析をおこなっている.本年度も解析が進み,25例で遺伝子変異を同定できた(うち5例は1方の変異のみ).これまでに解析してきた27例について追跡調査用紙を作成し,発送するところである.これをもとに遺伝子解析の結果と検討し遺伝子型/表現型の関係を明らかにする予定である.CT欠損症の解析:現在確立した方法は,免疫沈降を利用したものであるが,細胞分画法を採り入れ,さらに簡便な方法を確立した(投稿中).またT2,CT,SCOTがどの臓器,組織で発現しているかについてイムノプロット,ノーザンプロットを行い,ヒトにおける酵素の臓器分布を明らかにした(投稿中).VLCAD欠損症の解析:VLCAD欠損症と診断した3症例の遺伝子変異を同定した(論文作成中).

Research Products

• [Publications] Toshiyuki Fukao: "Immunotitration analysis of cytosolic acetoacetyl-CoA thiolase activity in human fibroblasts." Pediatr.Res.39. 1055-1058 (1996)
• [Publications] Y.-R.Xia,: "Assignment of the mouse ataxia-telanglectasia gene(atm) to mouse chromosome 9." Mammalian Genome. 7. 554-555 (1996)
• [Publications] Toshiyuki Fukao: "Prenatal diagnosis of succinyl-coenzyme A:3-ketoacid coenzyme A transferase deficiency." Prenatal Diagnosis. 16. 471-474 (1996)
• [Publications] Atsushi Imamura: "Prenatal Diagnosis of Adrenoleukodystrophy by means of mutation analysis." Prenatal Diagnosis. 16. 259-261 (1996)
• [Publications] Mitsuo Masuno: "Assignment of the human cytosolic acetoacetyl-coenzyme A thiolase (ACAT2) gene to chromosome 6q25.3-q26." Genomics. 36. 217-218 (1996)
• [Publications] Sacha Kassovska-Bratinoba: "Succinyl CoA:3-Oxoacid CoA transferase (SCOT) : human cDNA cloning,human chromosomal mapping to 5p13,and mutation detection in a SCOT-deficient patient." Am J.Hum Genet.59. 519-528 (1996)
• [Publications] Atsushi Imamura: "Prenatal Diagnosis of Adrenoleukodystrophy by means of mutation analysis." Prenatal Diagnosis. 16. 259-261 (1996)
• [Publications] Toshiyuki Fukao: "Association between Fcε RIβ and atopic disorder in Japanese population?" Lancet.348. 407 (1996)
• [Publications] I.Pecker,: "Identification and chromosome localization of ATM,the murine homologue of the ataxia-telangiectasia gene." Genomics.35. 39-45 (1996)
• [Publications] Yoichi Matsuda: "Comparative genome mapping of the ataxia-telangiectasia region in mouse,rat,and syrian hamster." Genomics.34. 347-352 (1996)
• [Publications] Toshiyuki Fukao: "Mild form of beta-ketothiolase deficiency (mitochondria acetoacetyl-CoA thiolase deficiency) in two Japanese siblings : identification of detectable residual activity and cross-reactive material in EB-transformed lymphocytes." Clinical Genetics.(印刷中). (1997)
• [Publications] Xiang-Qian Song: "Succinyl-CoA : 3-ketoacid coenzyme A transferase (SCOT) : development of an antibody to human SCOT and diagnostic use in hereditary SCOT deficiency." Biochem Biophys Acta. (印刷中). (1997)
• [Publications] Toshiyuki Fukao: "A novel exonic mutation (5319 G to A) resulting two aberrantly spliced transcripts on ATM gene in a Japanese patients with ataxia-telangiectasia." Hum.Mutat. (印刷中). (1997)
• [Publications] N.Kondo: "Reduced expression of the interferon-gamma messenger RNA in IgG2 deficiency." Scand.J.Immunol.(印刷中). (1997)