180kD類天疱瘡抗原リコンビナント蛋白を用いた類天疱瘡及び類縁疾患の抗原解析

Research Project

Project/Area Number	08770680
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Dermatology
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	大畑恵之慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30213838)
Project Period (FY)	1996
Project Status	Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help	¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000) Fiscal Year 1996: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywords	水疱症 / 免疫ブロット / 抗基底膜抗体 / 類天疱瘡抗原 / 180kD / リコンビナント蛋白
Research Abstract	基底膜に対する血中自己抗体を有する自己免疫性水疱性疾患として、水疱性類天疱瘡・妊娠性疱疹・瘢痕性類天疱瘡・後天性表皮水疱症・線状IgA水疱症などがあるが、これらは様々な臨床症状を呈し、かつ血中自己抗体が非常に低濃度で存在することも多い。これらのうち前3者は基底膜へのヘミデスモソームに局在する膜貫通性蛋白のひとつである180kD類天疱瘡抗原に対する血中自己抗体が病因に関与し、このうち細胞外に存在するNC160a領域がこれらの水疱症の共通抗原とされている。今回我々は、この領域に対応するcDNAを用いて大腸菌による融合蛋白を作成し、これらの水疱性疾患患者血清との反応性を免疫ブロット法にて調べ、その特異性、さらに病因への関与に関して検討を行った。その結果、類天疱瘡患者において、直接蛍光抗体法・間接蛍光抗体法ともに陽性の例では、ほぼ全例にNC16a陽性所見が認められた。特に、1MNaClで表皮を分離した検体を用いた間接蛍光抗体法においても弱陽性所見しか得られなかった症例や、寛解期の症例、また通常のヒト表皮抽出物を基質とした免疫ブロット法では230kD類天疱瘡抗原にのみ陽性で、180kD類天疱瘡抗原には陰性の症例でも陽性所見が認められた。妊娠性疱疹においては、症例数は少ないものの全例で陽性が認められ、臨床診断の確認に非常に有用であった。後天性表皮水疱症・天疱瘡・正常コントロールではすべて陰性で感度・特異度ともに高かった。以上のことから、類天疱瘡・妊娠性疱疹に対する簡便でかつ迅速な検査法が確立され、特に日常診療においてしばしば診断に苦慮する低抗体価、非定型例の診断において非常に有用と思われた。