シクロオキシゲナーゼ(COX)1と2阻害剤のラット角膜再上皮化における影響

• Project/Area Number: 08771523
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Ophthalmology
• Research Institution: Kyorin University
• Principal Investigator: 斉藤 博 杏林大学, 医学部, 助手 (20281347)
• Project Period (FY): 1996
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1996)
• Budget Amount: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000); Fiscal Year 1996: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
• Keywords: 創傷治癒 / 角膜の再上皮化 / COX1 / COX2

Research Abstract

シクロオキシゲナーゼ(COX)には正常状態で存在するCOX1と炎症状態で誘導されるCOX2の2つのタイプがあることが明らかになってきているが角膜上皮の創傷治癒との関係は検討されていない。本研究においてはラット角膜再上皮化モデルを作成して、COX1とCOX2の非選択的阻害剤のインドメサシン(IM)とCOX2の選択的阻害剤であるNS-398、COX2の誘導を阻害するとされているデキサメサゾン(DEX)の創傷治癒に及ぼす影響を検討した。
ウィスター雄ラット300〜350gを使用し、CO2ガスにて窒息死させ、直ちにGipsonらの方法に従い、直径3ミリのバイオプシーパンチで中央部に角膜上皮剥離を作成する。この状態で角膜上皮基底膜は実質上に残存することが確認されている。眼球摘出し強角膜切片を作成する。その際に虹彩、水晶体は丁寧に除去する。器官培養はGipsonらの方法に従い強角膜切片をEagle's minimum essential medium(MEM)で10回洗浄し、プラスチック組織培養皿(シャーレ、35℃、5%炭酸ガス)内にパラフィンで作られた角膜支持用の支柱に乗せる。各々IM、NS-398、DEXとともに器官培養し15時間後リチャードソン染色を行い、上皮欠損面積をNIHイメージを用いて測定した。残存した上皮欠損面積は10μMの薬剤の存在下では、IM群で3.54【.+-。】0.19mm^2、NS-398群で3.52【.+-。】0.42mm^2、DEX群で3.99【.+-。】0.27mm^2となり、対象と比較するとDEX群でのみ有意な上皮創傷治癒の遷延がみられた(p<0.01)。酵素学的にCOX1とCOX2の両者の活性が十分抑制されていると考えられる状態においても、ラット角膜上皮の創傷治癒は抑制されないものと考えられた。DEXは角膜の再上皮化を抑制したがその機序はCOX2の産生誘導の誘導の抑制によるものではないことが示唆された。