| Project/Area Number |
08771545
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
Ophthalmology
|
|---|
| Research Institution | Kurume University |
|---|
Principal Investigator |
三好 和 久留米大学, 医学部, 助手 (70268928)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1996
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
|
| Budget Amount *help |
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
|
|---|
| Keywords | HTLV-1ぶどう膜炎 / サイトカイン / RT-PCR / ELISA |
|---|
| Research Abstract |
HTLV-1感染で発症する「HTLV-1ぶどう膜炎(HU)」は、慢性再発性のぶどう膜炎である。HUの病態については、T細胞を主体としたリンパ球浸潤が認められ、浸潤細胞中に常にHTLV-1感染細胞が存在すること.ウイルス遺伝子及び選択的なIL-6mRNAの発現が認められることが特徴であることを明らかにしてきた.又、新鮮浸出細胞を用いたものおよび浸出細胞由来のTcell cloneを用いた結果から、眼内浸出Tリンパ球においては、IL-6およびTNF-αの発現が特徴であることを明らかにしてきた.
対象としてHU患者、無症候性キャリアー、他のぶどう膜炎患者の末梢血から単核球を分離し、Tcellを分画したRNAを抽出した.抽出したtotal RNA lugを用いてcDNAを作製し、RT-PCRで解析した。対象とした、サイトカインmRNAはIL-1α、IL-2、IL-4、IL-6、TNFα、IFNgとした.そのPCR産物はpolyacrylamide gelで電気泳動しelectro-blotによってmembraneへ転写し、サイトカインのprobeを用いてhybridize(シグナルの強度をバイオイメージアナライザーで測定した.これらをもとにサイトカイン遺伝子の発現レベルをβ-actinのそれとの相対比として定量的に解析した.
発現レベルに特異性の認められたサイトカインに関して、ELISA法によって血中のタンパクレベルの測定を行ったIL-6、TNFα、IFNg等のRT-PCRのデータとELISA法によるデータとをつき合わせて解析、検討中である.
|
