成人性歯周炎患者歯肉より分離した単核細胞によるサイトカイン遺伝子発現の検討

• Project/Area Number: 08771734
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Conservative dentistry
• Research Institution: Nihon University
• Principal Investigator: 武市 収 日本大学, 歯学部, 助手 (10277460)
• Project Period (FY): 1996
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1996)
• Budget Amount: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 1996: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: 成人性歯周炎 / 歯肉 / 単核細胞 / サイトカイン / mRNA / ヘルパーT細胞I型 / PCR法

Research Abstract

本研究では免疫機構の担い手であるヘルパーT細胞の機能を把握し、成人性歯周炎発症のメカニズムを解明することを目的とした。そこで、成人性歯周炎患者から歯肉組織を採取し、単核細胞を分離した後、Polymerase Chain Reaction(PCR)法により、インターロイキン(IL)2、ガンマーインターフェロン(IFN-γ)、IL-5およびIL-6の各遺伝子発現を比較検討し、以下の結果を得た。
1.成人性歯周炎歯肉(35例)から分離した単核細胞では、全症例の55.6%にIL-2mRNAの発現がみられ、40%にIFN-γ発現を認めた。また、IL-5の遺伝子発現は、全症例の14.3%であり、IL-6は全症例で検出されなかった。
2.得られた単核細胞をリコンビナントIL-2、concanavalin A、pokeweed mitogen、または大腸菌由来LPSで刺激したのち、上記と同様にサイトカインの遺伝子発現を検索したところ、全症例の57.1%にIL-2遺伝子の発現を認め、全ての症例でIFN-γmRNAの発現を検出した。また、IL-5およびIL-6遺伝子の発現は、それぞれ85.7%および45.5%であった。
3.上記遺伝子発現の特異性を、Southern hybridization法により確認した。また、PCR法のコントロールとしてβ-actin遺伝子の発現を検索したところ、全症例から同等のシグナルを得た。
以上の結果より、以下の結論を得た。
1.成人性歯周炎歯肉中の単核細胞はIL-2およびIFN-γ遺伝子を発現し、IL-5およびIL-6の遺伝子を発現しないことから、ヘルパーT細胞のI型であることが推察された。
2.炎症歯肉中の単核細胞を刺激すると、全てのサイトカイン遺伝子が発現されることから、IL-5およびIL-6遺伝子の発現能に異常はないと思われた。