| Project/Area Number |
08771884
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
Surgical dentistry
|
|---|
| Research Institution | Showa University |
|---|
Principal Investigator |
八上 公利 昭和大学, 歯学部, 講師 (00210211)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1996
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
|
| Budget Amount *help |
¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1996: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
|
|---|
| Keywords | ヒト軟骨肉腫 / インテグリン / 細胞外基質 / 軟骨形成 / 石灰化 / コラーゲン / フィブロネクチン / アルカリフォスファラーゼ |
|---|
| Research Abstract |
ヒト骨肉腫由来移植腫瘍を、生後6週齢ヌードマウスの背部皮下に移植継代し、6カ月後に摘出した。腫瘍組織を急速に凍結包埋後、クリオスタットにより4〜6μmの連続切片を作成し、3.7%ハラホルムアルデヒド/PBSにてスライドグラス上に固定した。そして、酵素抗体間接法にてファイブロネクチンおよびインテグリンの検出を行った。抗体には、ウサギ抗ヒト-ファイブロネクチン抗体、ウサギ抗ヒト-α2インテグリン抗体、ウサギ抗ヒト-α3インテグリン抗体、ウサギ抗ヒト-α4インテグリン抗体もしくはウサギ抗ヒト-α5インテグリン抗体を使用した。また、連続切片の一部をアルカリ・フォスファターゼ染色とフォン・コッサ染色で二重染色した。一方、腫瘍組織より細胞を分離したスライドグラス上に播種培養した後、固定して実験に用いた。そして、ファイブロネクチンおよびインテグリン(α2-5)の検出を酵素抗体間接法にて行った。また、一部をアルカリ・フォスファターゼ染色した。
その結果、ヒト顎骨肉腫移植腫瘍において、α2、α3、α4、α5のすべてのインテグリンの発現が確認された。そして、その発現部位は、主として胞巣辺縁部の軟骨細胞様細胞に見られ、特に、アルカリ・フォスファターゼ活性の認められる部位と一致して強かった。しかし、その発現は、中心部の肥大軟骨細胞様細胞や、フォン・コッサ染色に陽性な石灰化部分にはほとんど見られなかった。また、ファイブロネクチンもインテグリン同様に、主として胞巣辺縁部の軟骨細胞様細胞に発現が確認された。以上のことから、インテグリンおよびファイブロネクチンは、この移植腫瘍の軟骨細胞様細胞の分化や基質形成に関与していることが示唆された。一方、ヒト下顎骨肉腫由来軟骨細胞様細胞において、α2、α3、α4、α5のすべてのインテグリンの発現が確認された。
|
