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視床下部非シナプス性情報伝達機構の動態-コネクションを中心とした探求-

Research Project

Project/Area Number 08780732
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Nerve anatomy/Neuropathology
Research InstitutionKobe University

Principal Investigator

重吉 康史  神戸大学, 医学部, 助手 (20275192)

Project Period (FY) 1996
Project Status Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywordsコネクシン / クローニング / 視床下部 / IN SITU HYBRIDIZATION / PCR
Research Abstract

新たな神経系特に視床下部に発現するコネクシンを検索するために、ラット視床下部より、mRNAを採取し逆転写酵素にてcDNAを作成した。即ち、J-A Heafligerらの方法に準じてコネクシン分子においてその塩基配列が、よく保存されている膜貫通領域にてdegenerate primerを作成した。PCRにてP32-CTPの存在下において増幅されたフラグメントをポリアクリルアミドゲルに泳動してそこに現れたDNAのbandを切り出した。8本の切り出されたバンドからPCRをおこなってDNAを回収し、プラスミドベクターにサブクローンして、おのおののバンドについて10個のクローンについて塩基配列を解析した。その結果、新規コネクシンのクローンを得た。そのクローンについて現在、in situ hybridization,Northern hybridizationを用いて、神経系での発現に関して検討を加えている。
また、現在までに発表されているコネクシンの塩基配列を元にしてprimerを作成し、いくつかのコネクシン分子に関してPCRを用いて部分的なcDNAを得た。それをプラスミドベクターにサブクローンして、in situ hybridizationを行った結果、コネクシン32mRNA、および、コネクシン43mRNAに関しては神経系で広範な発現を認めた。また、これらのmRNAは中枢神経を傷害することによってその発現量が著明に増大することが確認された。コネクシン26mRNA,コネクシン33mRNAに関しては、中枢神経系にて明らかな発現を認めなかった。

Report

(1 results)
  • 1996 Annual Research Report
  • Research Products

    (3 results)

All Other

All Publications (3 results)

  • [Publications] Shigeyoshi,Y et al: "Lesion-induced neuronal nitric oxide synthase in Purkinje cells of the rat cerebllar corte" Molecular Brain Research. (In Press).

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Eguchi,T et al: "Role of Tachykinin NK-3 receptor in the Paraventricular nucleus in the central antidiuretic action in rats." Brain Research. 743(1-2). 49-55 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Tanaka,M et al: "Somatostatin neurons form a distinct peptidergic neuronal group in the rat Suprachiasmatic nucleus : A Double laleling in situ hybridization study" Neurosience Letters. 215(2). 119-122 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report

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Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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