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テトラヒメナの新しいCa^<2+>結合蛋白質の研究

Research Project

Project/Area Number 08874118
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 動物生理・代謝
Research InstitutionUniversity of Tsukuba

Principal Investigator

沼田 治  筑波大学, 生物科学系, 助教授 (50189354)

Project Period (FY) 1996 – 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1996: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywordsテトラヒメナ / カルシウム結合蛋白質 / カルモデュリン / 細胞骨格 / 接合 / 受精 / FK506結合蛋白質 / カルシニューリン / カルシウムイオン / ダイニン / 繊毛
Research Abstract

本研究はテトラヒメナの3種類のCa^<2+>結合蛋白質(分子量23,000と25,000のテトラヒメナCa^<2+>結合蛋白質[TCBP-23とTCBP-25]とカルモデュリン)の機能を解明することによって「Ca^<2+>が関与する生命現象がCa^<2+>結合蛋白質の分業体制によって制御されている。」という仮説を検証することを目的とする。本年度は以下のことを明かにした。
1.接合過程の突然変異体を用いて、TCBP-25が微小管と共存して配偶核の交換と核融合(受精)に関与していることを明かにした。
2.TCBP-23とTCBP-25は膜の裏打ち構造(エピプラズマ)に局在して116Kと130Kの蛋白質とCa^<2+>に依存して結合することを明かにした。116Kと130K蛋白質の精製を試み、エピプラズマをpH9.0の緩衝液で可溶化し、これらの蛋白質の精製に成功した。今後、TCBP-23、TCBP-25とこれらの蛋白質の相互作用を検討する予定である。
3.Ca^<2+>カルモデュリンに依存して機能するフォスファターゼ、カルシニューリンの阻害蛋白質であるFK506結合蛋白質をテトラヒメナより発見した。FK506結合蛋白質は免疫抑制剤FK506と結合するとカルシニューリンの機能を阻害し、免疫担当細胞の働きを抑えることが知られている。テトラヒメナにもFK506結合蛋白質が存在することは、この蛋白質が普遍的な生理機能に関与することを示唆している。この普遍的な機能を明かにするためにテトラヒメナを用いてカルモデュリン-カルシニューリン-FK506結合蛋白質が関与する生理機能を明かにしたいと考えている。

Report

(2 results)
  • 1997 Annual Research Report
  • 1996 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All Other

All Publications (11 results)

  • [Publications] T.Takeda, Y.Watanabe, and O.Numata: "Direct demonstration of the bifunctional property of Tetrahymena 14-nm filament protein/citrate synthase following expression of the gene in Escherichia coli" Biochem.Biophys.Res.Commun.237. 205-210 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] H.Kojima, Y.Watanabe, and O.Numata: "The dual functions of Tetrahymena citrate synthase are due to the polymorphism of its isoforms" J.Biochem.122. 998-1003 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] A.Watanabe, Y.Kurasawa, Y.Watanabe, and O.Numata: "The new Tetrahymena actin-binding proteins is localized in the division furrow" J.Biochem.123(in press). (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] O.Numata, K.Hanyu, T.Takeda, and Y.Watanabe: "Tetrahymena calcium-binding proteins,TCBP-25 and TCBP-23 in TETRAHYMENA THERMOPHILA (D.J.Asai,J.D.Forney eds.)" Academic Press,San Diego (in press), (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Kurasawa,Y.,Hanyu,K.,Watanabe,Y.and Numata,O: "F-actin bundling activity of Tetrahymena elongation factor 1 α is regulated by Ca^<2+>/calmodulin." J.Biochem.Vol.119. 791-798 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Hanyu,K.,Numata,O.,Takahashi,M.and Watanabe,Y: "Immunofluorescence localization of a 23-kDa Tetrahymena calcium-binding protein,TCBP-23,in the cell cortex." J.Biochem.Vol.119. 914-919 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Kurasawa,Y.,Watanabe,Y.and Numata,O: "Characterization of F-actin bundling activity of Tetrahymena elongation factor 1 α investigated with rabbit skeletal muscle actin." Zool.Sci.Vol.13. 371-375 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Kato,M.,Watanabe,Y.and Numata,O: "Tetrahymena nuclear proteins that bind to a micronucleus-specific sequenceduring vegetative growth." Zool.Sci.Vol.13. 527-531 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Numata,O.,Yamazaki,A.and Watanabe,Y: "Tetrahymena 14-nm filament protein (49K protein) and citrate synthase are expressed by the same gene." Europ.J.Protistol.Vol.32 Suppl.1. 108-113 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Kanzawa,N.,Numata,O.,Watanabe,Y.and Maruyama,K: "Identification and characterization of Tetrahymena myosin." Comp.Biochem.Physiol.Vol.115B. 547-551 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report
  • [Publications] Watanabe,Y.,Hanyu,K.,Takemasa,T.and Numata,O: "TCBP-25.In Guidebook to the Calcium Binding-Proteins (Celio,M.R ed.)" Sambrook and ToozePublication at Oxford University Press, 4 (1996)

    • Related Report
      1996 Annual Research Report

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Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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