RAD54変異ニワトリBリンパ細胞株の、DNA複製中に起ったDNA損傷の解析

• Project/Area Number: 09254229
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 武田 俊一 京都大学, 医学研究科, 教授 (60188191)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩井 裕子 京都大学, 医学研究科, 助手 (10281726) ; 園田 英一郎 京都大学, 医学研究科, 助手 (50281093) ; 高田 穣 京都大学, 医学研究科, 助手 (30281728)
• Project Period (FY): 1997
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1997)
• Budget Amount: ¥4,000,000 (Direct Cost: ¥4,000,000); Fiscal Year 1997: ¥4,000,000 (Direct Cost: ¥4,000,000)
• Keywords: DT40 / 相同組み換え / 組み換え修復

Research Abstract

ゲノムDNA上に2本鎖切断が起こり、それが修復されないと真核細胞は死亡する。真核細胞は、組み扱え修復(相同組み換え)とend joiningという2種類のDNA2本鎖切断修復経路を待つ。これらの生化学反応に関わるタンパク群は、その1次構造が酵母からヒトに至るまで非常によく保存されている。組み換え修復に関わる遺伝子群をRAD52エピスタシスグループと呼び、10種類以上の遺伝子が酵母とヒトでそれぞれ知られている。RAD51は、このエビスタシスグループの一員であり、酵母のRad51欠損株は、増殖可能であるが、ゲノム上に2本鎖切断を誘導する電離放射線照射に対して著しく感受性がある
我々は、高等真核細胞(ニワトリBリンパ細胞株、DT40)からRad51コンディショナルミユ-タント細胞を世界で初めて作成した(Sonoda et al,EMBO J.,Vol.17;598-608,1998)。このミユ-タントのRad51の発源を停止させると、少数のランダムな染色体断裂がM期で観察され、ほとんどの細胞は分裂後、死亡する。この結果は、高等真核細胞では増殖中に染色体断裂が起き、Rad51はその断裂を修復するのに必須の働きをしていることを示唆する。
相同組み換え機構が、染色体の構造維持にかかわっているという我々の研究結果は、その異常が染色体構造を不安定にし、発ガンの原因になりうることを示唆する。

Research Products

• [Publications] Bezzubova,O.: "Reduced X-ray resistance and homologous recombination frequencies in a RAD54^<-/-> mutant of the chicken DT40 cell line." Cell. 89. 185-193 (1997)
• [Publications] Sonoda,E.: "Rad51 deficient vertebrate cells accumulate chromosomal breaks prior to cell death." EMBO J.17. 598-608 (1998)
• [Publications] Tanabe M.: "Disruption of the HSF3 gene results in the severe reduction of heat shock gene expression and loss of thermotolerance." EMBO J.in press.