NSF結合タンパク質の同定と開口分泌における役割

Research Project

Project/Area Number	09260228
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Tokyo University of Pharmacy and Life Science
Principal Investigator	多賀谷光男東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (30179569)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	谷佳津子東京薬科大学, 生命科学部, 講師 (40266896)
Project Period (FY)	1997
Project Status	Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help	¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000) Fiscal Year 1997: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywords	開口放出 / 神経伝達物質 / N-エチルマレイミド感受性因子 / VCP
Research Abstract	NSFはSNAPおよびSNAREと複合体を形成し、神経伝達物質の開口放出に関与することが知られている。最近、我々は英国のHenleyら(プリストル大)との共同研究によって、NSFがAMPA型のグルタミン酸受容体(GluR2)と相互作用していることを明らかにした。NSFとGluR2との相互作用は直接的であり、SNAPを介さない。SNAPやGluR2以外にNSFと相互作用するタンパク質を同定するために、酵母のtwo-hybrid法を用いてNSFと相互作用する脳タンパク質の検索を行った。しかしながら、相互作用するタンパク質として見つかったのは全てNSF自身であった。NSFはそのC末端で強く相互作用して六量体を形成することが知られており、そのためこのスクリーニング法ではNSF自身しか見つからなかったものと考えられる。 NSFは神経伝達物質の開口放出以外にも有糸分裂時のゴルジ体の形成反応にも関与するが、この反応にはVCPというタンパク質も関与する。VCPはNSFと同様に六量体タンパク質であり、一次構造的にもNSFに類似している。最近、VCPの膜受容体はNSFと同様にSNAREであるという報告があり、VCPがNSFと協調して開口放出にも関与している可能性が考えられた。そこで、two-hybrid法でVCPと相互作用するタンパク質の検索を行ったところ、VCP間での相互作用は全く認められず、2つの新規タンパク質を同定することができた。その内の一つはp47であり、VCPと結合しているタンパク質であることが、ごく最近英国のWarrenのグループによって報告された。もう一つのタンパク質は未知のものであり、現在、その構造決定を進めている。今後、VCPの開口放出機構への関与について検討する予定である。