| Project/Area Number |
09261201
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
新田 勝利 北海道大学, 大学院・理学研究科, 教授 (80001858)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 敬一 北海道大学, 大学院・理学研究科, 助教授 (10136492)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1997
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1997)
|
| Budget Amount *help |
¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
|
|---|
| Keywords | リゾチーム / ホールディング |
|---|
| Research Abstract |
新しいカルシウム結合リゾチーム
ヒグマのミルクリゾチームを単離精製し、アミノ酸配列の決定を試みた。現在4残基を残して決定された。予想どうりα-ラクトアルブミンと同様のカルシウム結合部位をもっていた(未発表)。
カルシウム結合定数の決定
ヒグマ、ハリモグラ(単孔類)、イヌのミルクリゾチームのカルシウム結合定数をQuin-2を地居て決定した。結果を既知のカルシウム結合リゾチーム、α-ラクトアルブミンと比較した。結合強度に1桁以上の変異があるが変化に統一性は見られない(投稿中)。
ヒトリゾチームにカルシウム結合部位を不完全導入した変異体ではQ86D/D91Q/A92Dの2Asp変異体が2X10^4M^<-1>の結合定数を示した。
カルシウム結合リゾチームのUnfolding-Refolding Profile
これまでウマミルクリゾチームはアルファーラクトアルブミンと同様に安定なモルテングロビュール状態をとるがハト卵白リゾチームはconventional lysozymeと同様に安定なモルテングロビュール状態は存在しないことが知られていた(Nitta et al.,1993)。イヌリゾチームはウマリゾチームと同様にグアニジン変性において安定なモルテングロビュール状態が観察されたがハリモグラのリゾチームではそれが観察されず、ハトリゾチームと同様であった。アミノ酸配列の比較からカルシウム結合リゾチームには真獣類ミルクリゾチームと単孔類-鳥類リゾチーム2つの系統があるとする考えがあるがFolding Profileはこの2つの系統で異なった挙動を示した(投稿中)。
|
