寄生各ステージにおけるマラリア原虫の蛋白質燐酸化、脱燐酸化酵素の解析と役割の検討

• Project/Area Number: 09270214
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 斎藤 あつ子 神戸大学, 医学部, 講師 (00223131)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 潮 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (40150354)
• Project Period (FY): 1997
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1997)
• Budget Amount: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000); Fiscal Year 1997: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
• Keywords: Plasmodium / Plasmodium falciparum / マラリア / 蛋白質燐酸化酵素 / 蛋白質脱燐酸化酵素 / in gel kinase assay / 阻害薬 / 赤血球寄生機構

Research Abstract

目的
本研究の目的は、燐酸化酵素、脱燐酸化酵素の作用薬(阻害薬や活性化薬)を用いた薬理学的解析と、ゲル内燐酸化法などの生化学的解析を組み合わせ、マラリア原虫の燐酸化、脱燐酸化酵素の生理的機能を明らかにすることである。
結果と考察
1、Calphostin C,Staurosporine,KN62などのCa^<2+>-dependent protein kinaseの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御した。
2、P.falciparumの約115-175kDaの5種のprotein kinase、約64kDaのprotein kinaseがtrophozoiteからschizontにかけて強く発現することが観察された。54kDのCa^<2+>-dependent protein kinaseはschizontからtrohozoite期にかけて強く発現する傾向があった。
1、2の結果より、Ca^<2+>-dependent protein kinaseは、赤血球期原虫の分裂増殖の制御に関与していることが示唆された。
3、Calyculin A、Okadaic acidなどprotein phosphatase 1、2Aの阻害剤がP.falciparumのin vitroの増殖を強く制御し、特にtrophozoiteに強い増殖抑制効果を示した。
4、P.falciparumにserine/threonine phosphatase type 1およびtype2活性が存在することが、明らかにされ、protein phosphatase type1活性が優位であった。
3、4の結果より、protein phosphatase type1は赤血球期原虫の増殖に必須で、trophozoite期で重要な役割を果していると考えられた。