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転写因子TFIIFの伸長因子としての機能解析

Research Project

Project/Area Number 09277211
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

北嶋 繁孝  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (30186241)

Project Period (FY) 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
KeywordsTFIIF / 転写伸長 / 転写開始 / p32 / DNA依存性リン酸化酵素
Research Abstract

1。TFIIFは、転写の開始/伸長因子である。この両反応過程でのIIF機能を知るためにRAP74サブユニットと相互作用しその機能を制御する蛋白質をスクリーニングした。酵母の2-ハイブリッド法によってRAP74の中央ドメインと特異的に結合する蛋白質p32を得た。p32は、核内にもわずか存在したがほとんどがミトコンドリアマトリックスに存在すること、p32のホモログは、ヒトのほかにマウス、線虫、酵母でも認められること、酵母p32ホモログ-p30と命名-のノックアウト株は、呼吸機能の障害がおこりp30がミトコンドリア機能に重要であることがわかった。p32はIIFのほかにも核内蛋白のIIB,ラミン、エイズウイルスの転写因子Tatとも相互作用するので核内転写を制御する可能性もある。事実、in vitroアッセイ系を用いて転写伸長活性への影響をテストしたところ、p32がIIF活性をTat共存下で促進させる結果を得た。今後、この解析とともにRAP74の他のドメインと結合するクローンのスクリーニングを続ける。
また、RAP74のC-末欠失タンパクを強制発現させ、in vivoでの転写活性を見るために、発現プラスミドを作製した。
疾患におけるIIF機能の関わりを知る一端として自己免疫疾患患者の血清を調べることでSLEをはじめとする患者にRAP74に対する自己抗体が存在することを見い出した。
2。核に存在する細胞障害チェック機構であるDNA依存性リン酸化酵素が、TBP,IIBをリン酸化することがわかった。IIFのリン酸化は明らかではなかった。TBP,IIBのリン酸化による転写基本活性調節を明らかにした。

Report

(1 results)
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Kamura,T., et al: "Characterization of the human thrombopoietin gene promoter : A possible role of an Etstranseiption factor E4TF1/GABP" J.Biol.Chem.272. 11361-11368 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Chibazakura,T., et al: "Phosphorylation of human general transeiption factors TATA-birding protein and IIB by DNA-dependent protein kinase : Synergistic stirnulation of RNA polymerere II basal transeiption in vitro" Eur.J.Biochem.247. 1166-1173 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Cai,Y., et al: "Autoantibodies against human general transeiption initiation factor TFIIF in sera of autoimmune diseases" Clin.Exp.Immunol.109(3). 488-494 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Muta,T., et al: "p32 protein,a splicing factor 2-associated protein,is localized in mitochondrial matrix and funetionally important in maintaining oxidative phoiphorylation." J.Biol.Chem.272. 24363-24370 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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