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遺伝子導入ハエを用いたDNA複製関連遺伝子の発現制御に関する研究

Research Project

Project/Area Number 09277230
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionAichi Cancer Center Research Institute

Principal Investigator

廣瀬 富美子  愛知県がんセンター, 生物学部, 主任研究員 (60208882)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山岸 正裕  工業技術院生命工業技術研, 分子生物部, 主任研究官 (00220252)
山口 政光  愛知県がんセンター, 生物学部, 室長 (00182460)
Project Period (FY) 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywordsショウジョウバエ / DNA複製 / 転写因子 / 遺伝子導入ハエ
Research Abstract

個体を用いたDREFの機能解析に必要な遺伝子導入ハエを樹立し、DREFの異所的な発現によってもたらされDNA複製や細胞増殖の異常を詳細に解析し、以下の結果を得た。(1)DNA結合活性および二量体形成活性の両者を有するDREFのN端125アミノ酸残基は、dominant-negativeな効果をもつことが明らかとなった。(2)唾腺においては、dominant-negative型DREFを発現させると、この組織におけるDNA複製が阻害され、DNAの多糸化の程度が抑えられたことから、DREFはendo cycleにおけるDNA複製に必須であることが証明された。(3)glass遺伝子のプロモーターを利用して、複眼原基のpost-mitoticな分化過程にある細胞で野生型DREFタンパク質を発現させると、異所的なDNA複製とアポトーシスが誘導され、秩序だった複眼の形態形成は乱されて、rough eye phenotypeを示した。また、正常な分化も乱されて、光受容細胞R1,R6,R7の形質を示す細胞が形成されなかった。このことは、DREFは、細胞増殖と分化の接点で機能する転写因子であることを意味する。(4)DREFの哺乳類細胞におけるホモログを単離する準備として、Drsosophila melanogasterの近縁種であるDrosophila virilisよりDREFホモログの遺伝子を単離し、よく保存された領域が3つ(CR1,CR2,CR3)あることを明らかにした。(5)DREFと相互作用する因子の遺伝子を単離するための、遺伝学的スクリーニングの準備を整えた。

Report

(1 results)
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Hayashi,Y.et al: "Identification of CFDD (Common regulatory factor DNA replication and DREF gene) and rela its binding cite in regulation of the proliferating nuclear antigen gene promoter" J.Biol.Chom. 272. 23848-23858 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Takahashi,Y.et.al.: "Involvement of the DNA replication-related element (DRE) and DRE-binding factor (DREF) in transcriptional regulation of the Bombyx mori PANA gene" J.Biochem. 122. 1215-1223 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Yamaguchi,M.et.al.: "Distinct roles of E2F recognition sites as positive and negative elements in regulation of DNA polymeraseα 180kDa codalytic subunit gene promoter during Drosophila development" Nucleic Acids Res.25. 3847-3854 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Kuge,M.et al.: "Use of a fusion protein to obtain crystal suitable for x-ray analysis : Crystallization of a GST-fused protein containing the DNA-binding domain of DNA replication-ralatef element binding factor," Protein Sci.6. 1783-1786 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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