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レチノイドレセプター遺伝子導入による膵癌遺伝子治療についての基礎的検討

Research Project

Project/Area Number 09670513
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Gastroenterology
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

川邊 隆夫  東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (40195136)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 大橋 誠  東京大学, 医学部・附属病院, 医員
金井 文彦  東京大学, 医学部・附属病院, 医員
白鳥 康史  東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (70196624)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,900,000 (Direct Cost: ¥2,900,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords膵癌 / レチノイドレセプター / 遺伝子導入 / テロメラーゼ活性 / レチノドレセプター
Research Abstract

テロメラーゼ活性を有する6種の膵癌細胞株AsPc-1、BxPC-3、KP-IN、MIAPaCa―2、PANC-1、Su.86.86、およびコントロールとして白血病細胞株HL-60を用い、培養上清中に全トランスレチノイン酸(ATRA)、あるいは9-シスレチノイン酸(9-clsRA)を1μMの濃度で添加し、6日間培養した後、1×CHAPS溶解液で蛋白抽出液を作成した。各抽出液の蛋白量を定量後、蛋白濃度が等しくなるように調製してassayに用いた。テロメラーゼ活性はKimらのTRAPassayに基づいて評価した。白血病細胞株HL-60の培養上清中にATRA、9-cisRAを添加するとテロメラーゼ活性は抑制されたが、6種の膵癌細胞株では、テロメラーゼ活性の抑制は認められなかった。そこで、アデノウイルスベクターを用いた膵癌細胞株へのRAR(Retinoic Acid Recepter)およびRXR(RetinoidX Recepter)遺伝子の導入、およびそれに基づく遺伝子治療を試みた。まず、RARおよびRXR遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターの作製し、膵癌細胞株(AsPC-1、BxPC3,KP-1N、MIAPaCa-2、PANC1、Su.86)トランスフェクトした。これら細胞株のrecepter発現について、免疫組織染色、ウエスタンブロット法により検討したが、現在のところそれ程強い過剰発現はみられていない。また、このトランスフェクト細胞株において、ATRAおよび9-sisRAのテロメアーゼにおよぼす影響についても検討したが、テロメラーゼ活性を抑制する作用は認められなかった。これは十分なレチノイドレセプターの過剰発現が得られていないためである可能性が高く、現在さらに、効率良くRARおよびRXRを発現させるためにトランスフェクトの条件を検討中である。

Report

(3 results)
  • 1998 Annual Research Report   Final Research Report Summary
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All Other

All Publications (9 results)

  • [Publications] Kanai F、Ohashi M: "Invivo gene tharapy for alpha-fetoprotein-producing hepatocelluar carcinoma by adenovirus-mediated transfer of cytosine deaminase gene"Cancer Res. 57. 461-465 (1997)

    • Related Report
      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Ohashi M、Kawabe T: "In vivo adenovirus-mediated produg gene therapy for carcinoembryonic antigen-producing pancreatic cancer"Jpn.J Cancer Res. 89. 457-462 (1998)

    • Related Report
      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Shiratori Y、Karai F: "Gene-therapy for hepaticmicrometastasis of murine colon carcinoma"J Hepatology. 28. 886-895 (1998)

    • Related Report
      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Ohashi M、Kawabe T: "Adenovirus mediated p53 tumor suppreor gene therapy for human gastric cancer cells in vitro and in vivo"Gut. 44. 366-371 (1999)

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      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Kawabe T、Shiratori Y: "High proportion of mutant K-ras gene in pancreatic juice of patients with pancreatic cystic lesions"Gut. 45. 737-740 (1999)

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      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Kawabe T、Shiratori Y: "Washout of small stones in the bile duct by saline infusion using aside-holed balloon catheter in patients undergoing endoscopic papillary balloon dilation"Gastrointest Endosc. 46. 101-104 (1999)

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      1998 Final Research Report Summary
  • [Publications] Ohashi M.Kawabe T: "In vivo adenovirus-mediated prodrug gene thepapy for carcinombyonic antigen-producins pancreatic cancer" Japnese Journal of Cancer Research. 89. 457-462 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Kanai F.Ohash M: "In vivo gene therapy for alpha-fetprotein-producing hepatocellular carcinoma by adenovirus-mediated-traasfer of cytosine cleaminase gene" Cancer Research. 57. 461-465 (1997)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Shiratori Y.Kanai F: "Gene therapy for hepatic micrometastasis of murine colon carcinoma" Journal of Hepatology. 28. 886-895 (1998)

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      1998 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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