• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to previous page

リコンビナント自己抗原を使用した高感度抗ミトコンドリア抗体測定法の開発と臨床応用

Research Project

Project/Area Number 09670583
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Gastroenterology
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

茂木 積雄  日大, 医学部, 助手 (10200338)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 天木 秀一  日本大学, 医学部, 助手 (70246859)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywords抗ミトコンドリア抗体(AMA) / 原発性胆汁性肝硬変(PBC) / リコンビナント自己抗原 / エピトープマッピング / リボイルドメイン
Research Abstract

原発性胆汁性肝硬変(PBC)に特徴的な抗ミトコンドリア抗体(AMA)亜型である"M2"抗体はミトコンドリア内膜に存在する酵素である2-oxoacid dehydrogenase complex(2-OADC)ファミリーに属するpyruvate dehydrogenase(PDC),branched chainα-ketoacid dehydrogenase complex(BCOADC),2-oxoglutarate dehydrogenase complex(OGDC)を構成する5つのsubunit enzymes(PDC-E2,BCOADC-E2,OGDC-E2,protein X,PDC-E1α)を特異的に認識する。分子生物学的および遺伝子工学的手法を用いた研究により,M2抗体が認識する主要なミトコンドリア抗原であるPDC-E2,BCOADC-EおよびOGDC-E2上のlipoic acid binding resionであるリポイルドメイン上に主要な抗原エピトープが各々存在することが明らかになった。これらのエピトープマッピングの成績に基づき高感度AMA測定法の確立を試みた。すなわち,PDC-E2,BCOADC-E2およびOGDC-E2の各々のリポイルドメインをコードするcomplementary(c)DNAを同一のプラスミドベクターにサブクローニングすることによりHybrid cloneを確立した。Hybrid cloneおよび各々のE2 component cDNA cloneによって発現されたリコンビナント抗原をグルタチオンアガロースビーズを用いてアフィニティー精製した。イムノブロット法による検討で,これらの精製リコンビナントミトコンドリア抗原はPBC患者血清と特異的に反応し,自己免疫性肝炎やC型慢性肝炎などの対照疾患および健常人血清などとは反応しなかった。また,PBC 112例においてラット腎胃組織切片を抗原とした蛍光抗体法(IF)および市販の酵素抗体法(ELISA)によってAMAの検討を試みたところ9例はAMA陰性であったが,リコンビナントミトコンドリア抗原を用いた検討によってPDC-E2以外のM2抗原とのみ特異的に反応するPBC血清を明確に検出することが可能となった。

Report

(1 results)
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All Other

All Publications (6 results)

  • [Publications] 茂木積雄,他: "リコンビナントOGDC-E2自己抗原の発現とエピトープマッピング" 肝臓. 38巻Supplement(1). 112- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 茂木積雄,他: "抗ミトコンドリア抗体陽性のPBC患者血清と反応するOGDC-E2 Ca B cell equitopeの解析" 日本臨床免疫学会会誌. 20巻4号. 321- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 茂木積雄,他: "2-OADC familyのE2 component lipoyl domainとPBC患者血清との反応性" 肝臓. 38巻Supplement(2). 72- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 茂木積雄: "自己抗体測定の進歩と病態診断の新しい展開-抗PDH抗体" 臨床病理. 45巻Supplement. 20- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 茂木積雄: "2-oxo glutarate dehydrogenase complex E2 compoment上のB cell epitopeの解析とPBC血清との反応性" 臨床病理. 45巻Supplement. 204- (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 天木秀一,茂木積雄,他: "PBC男性例" medicina. 35巻1号. 102-104 (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

URL: 

Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi