AvbitravilyPriwedPCR法によるヒトがんの分子的核型分析法の確立

• Project/Area Number: 09770135
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Human pathology
• Research Institution: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• Principal Investigator: 安田 純 国立がんセンター (00281684)
• Project Period (FY): 1997
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1998)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 1998: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 1997: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: 放射線照射ヒト齧歯類雑種細胞DNAパネル / AP-PCR法 / SHARP法

Research Abstract

放射線照射ヒト齧歯類雑種細胞DNAパネル(放射線照射雑種細胞パネル)によるヒトゲノムArbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction(AP-PCR)DNA指紋産物の詳細で効率的なマッピング技術の開発の第一段階として、AP-PCRの反応時のプライマーの鋳型配列への会合の特異性について基礎的な研究を行った。AP-PCRの反応条件ではプライマーまたは鋳型がそれぞれループ構造をとり、会合の安定性を増している可能性があることを見いだし、論文にまとめ投稿した。また、ヒト腫瘍細胞で特異的な増幅を示したAP-PCR断片を放射線照射雑種細胞パネルを用いてマッピングし、近傍に存在するがん遺伝子をサザンブロットで解析し、遺伝子増幅を認めた。この解析の過程で放射線照射雑種細胞パネルによるヒトAP-PCRDNA指紋産物のマッピング技術に欠かせないSimultaneous Hybridization of Arbitrarily Primed PCR(SHARP)法を応用した。

Research Products

• [Publications] Uematsu K, Yasuda J, Sekine T, Sugano K, Kudoh S and Sekiya T: "A new T-lymphocyte cloning assay for detection of in vivo mutations in the human hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase gene." Environmental and Molecular Mutagenesis. 30. 31-39 (1997)