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牛のボツリヌスC型、D型中毒の両方に効果のあるリコンビナントワクチンの作製

Research Project

Project/Area Number 09770180
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Bacteriology (including Mycology)
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

藤永 由佳子  岡山大学, 医学部, 助手 (60252954)

Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 1998: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
KeywordsClostridium botulinum / ボツリヌス毒素 / neurotoxin / ワクチン / 経鼻接種
Research Abstract

安全で効果の高いボツリヌスC,D型リコンビナントワクチンを作製する目的で,C型HAl,HA2,およびHA3のGST(glutathione-S-transferase)融合タンパク質とアジュバントとして大腸菌のLTを加えて、マウスに経鼻接種したところ、ワクチン効果はあるが、C型progenitor toxinをアルカリ処理して調製した無毒成分のトキソイドを同様に接種した場合より、弱く不充分であった(前年度報告書)。リコンビナント混合ワクチンの場合、高次構造がnativeのHA部分と異なる可能性があるため、神経毒素(軽鎖および重鎖)を含まなC型progenitor toxinの変異体を、ボツリヌス(C)-N71株より精製し、そのワクチン効果を検討した。その結果、(C)-N71のProgenitortoxin変異体ワクチンもリコンビナントワクチンと同様に、効果はあるが弱く不充分であることが明らかとなった。
各ワクチンを投与したマウスの腸液および血清を用いたウエスタンブロッティングを行ったところ、C型progenitor toxinより調製した無毒成分のトキソイドを投与したマウスの血清および腸液中には、無毒成分に加えて、ワクチン中に混入していた神経毒素の軽鎖および重鎖に対する抗体が存在していた。リコンビナントワクチンと(C)-N71のprogenitor toxin変異体を投与したマウスでは、それぞれHa、HAとNTNHに対する抗体は存在していたが、神経毒素に対する抗体は検出されなかった。従って高いワクチン効果を得るためには神経毒素成分も重要であると考えられる。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (13 results)

All Other

All Publications (13 results)

  • [Publications] Nakajima,H., et al.: "Molecular composition of the 16S toxin produced by a Clostridium botulinum type D strain, 1873." Microbiol.Immunol.42. 599-605 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] J.C.Marvaud., et al.: "botR/A is a positive regulator of botulinum neurotoxin and associated non-toxin protein genes in Clostridium botulinum A." Mol.Microbiol.29. 1009-1018 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Yokota,K., et al.: "Classification of Clostridium butyricum based on sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis and pulsed-field gel electrophoresis." Anaerobe.4. 177-181 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二 他: "ボツリヌス毒素" モダンメディア. 44・7. 213-222 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二 他: "ボツリヌス症" 最新医学. 54・3増刊号in press.(1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二 他: "毒素産生菌とその感染症" 竹田美文,本田武司, 255 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Fujinaga, Y., et al.: "The haemagglutinin of Clostridium botulinum type C progenitor toxin plays an essential role in binding of toxin to the epithelial cells of guinea pig small intestine,leading to the efficient absorption of the toxin." Microbiol.143. 3841-3847 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Oguma, K., et al.: "Clostridium botulinum." J.Toxicol.-Toxin Reviews. 16・4. 253-266 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二, 他: "感染症における病原因子-ボツリヌス菌-" 臨床検査. 41・6. 646-654 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 井上 薫, 他: "ボツリヌス神経毒素-無毒成分複合体の構造と機能" 蛋白質 核酸 酵素. 42・10. 2049-2060 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二, 他: "ボツリヌス毒素" 治療学. 31・12. 1467-1473 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Oguma, K., et al: "Microbial foodborne diseases : Mechanisms of pathogenesis and toxin synthesis." Linz J.E.,Bhatnagar D.,Stein M.A., and Cary J.W. (in press), (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 小熊惠二, 他: "ウイルス・細菌感染症newファイル(実験医学別冊メディカル用語ライブラリー)" 永井美之,渡邊治雄, 243 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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